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(無題) 削除/引用 No.1814-4 - 2009/12/24 (木) 15:26:35 - ~ 3000bpならば増やせると思いますが、配列や材料次第です。 増えれば、カラム精製くらいでシークエンシングに使えるテンプレートになるでしょう。 ところで、本当にPCRで増やしてから読む必要があるのですか？ 材料によっては、PCRで増やさなくても読めます。 ゲノムからPCRで増やした場合、ヘテロな配列であれば１塩基に２つのピークが生じたり、ずれたりするでしょう。 クローニングすると、PCRのエラーを拾うかもしれませんが、その配列をそのまま使うことが出来るでしょう。 そのため、何のために読むのかと、どの段階のサンプルを読むのかは考えた方がいいと思います。

(無題) 削除/引用 No.1814-3 - 2009/12/24 (木) 13:16:05 - おお 出来る確率はそこそこあると思います。目的が分からないのですが、 どうせシーケンスの時に途中にプライマーが必要でしょうから、 全長でかからなかったら、そのプライマーを使ってわけて増幅 すると言うのも視野に入れるといいかと思います。

(無題) 削除/引用 No.1814-2 - 2009/12/24 (木) 12:37:25 - やま テンプレートの綺麗さにもよると思いますが、 PCRで3kbpは余裕です。 シークエンスしたいのはゲノムですか？ ゲノムを抽出してPCRなら余裕です。 もし、コロニーPCRとかならちょっと厳しいと思います。

シークエンスについて 削除/引用 No.1814-1 - 2009/12/24 (木) 12:33:14 - ship シークエンスについて質問です。 3000bpくらいのものをシークエンスしたいと考えております。 その場合まず3000bpの部分をPCRかけてPCR産物を作ると思うのですが,普通のPCRの機械で3000bpもの広い範囲についてシークエンスできるPCR産物を作ることは可能なのでしょうか？

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