Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

最新のフォーラム | このフォーラム | ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

免染抗体の使い回し トピック削除
No.1770-TOPIC - 2009/12/16 (水) 14:20:15 - pleco
免疫染色の抗体について質問です。

PBSで1:50程度に希釈して、一度染色に使用した一次抗体って
回収して再利用できますか?
「抗体による」「やってみないとわからない」かもしれませんが、
どなたかされている方がいれば(全く不可能でなければ)
試してみようと思い、質問させていただきました。

その場合、4℃でどれくらい持つのか、
参考までに経験談を教えて頂けるとうれしいです。
よろしくお願いします。
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



7件 ( 1 〜 7 )  前 | 次  1/ 1. /1


濃い方が安定 削除/引用
No.1770-7 - 2009/12/18 (金) 00:24:11 - ぽすどく
 一般的に、抗体を保存するときは、抗体の濃度が高いほうが安定(より長く保存できる)ということが言われています。

(無題) 解決済み 削除/引用
No.1770-6 - 2009/12/17 (木) 14:51:04 - pleco
皆様、貴重なご意見をありがとうございました。

>kodama様
羊土社のプロトコルにも書かれていたのですね。
ウエスタンでも使い回せるとは、、、勉強になりました。

>mouse様
せいぜい持っても一晩か数日だと思っていたので、
1〜2ヶ月も使えるとは驚きました。

>う様
う様のおっしゃる通りかと思います。
使い回しを試すときはできるだけベストな状態で行いたいと思います。

>よっしー様
希釈濃度、液量ともにいつもケチケチでやっているので
それも考えられる状況ですね。

皆様のご意見を参考に、試すときには菌のコンタミに気をつけます。
ありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.1770-5 - 2009/12/16 (水) 20:19:26 - よっしー
plecoさんが私のようにいつもケチケチぎりぎりまで希釈して使っていれば,難しいと思います.
そうでなければコンタミに注意していれば,結構使えると思いますが・・・
あくまで思うですが

(無題) 削除/引用
No.1770-4 - 2009/12/16 (水) 17:18:52 - う
言えることは
使い回しは可能である
ということです。

何回使用可能か?、保存可能期間はどのくらいか?

抗体による、使い方による、環境による、その人の手技による。

(無題) 削除/引用
No.1770-3 - 2009/12/16 (水) 16:53:21 - mouse
組織のサイトカイン等を免染していますが、1-2カ月以内、4℃保存で2回まで染められています。3回目まで試したことはありませんが、いけそうですね。

(無題) 削除/引用
No.1770-2 - 2009/12/16 (水) 14:42:10 - kodama
経験者です。
滅菌マイクロチューブに回収しました。


再利用は不可能ではありません。私は培養細胞での免疫染色に利用した抗体を頂き、組織切片を染めていました。防腐剤を入れていないので数日のうちに実験に使いました。

羊土社の「免疫染色最新プロトコール」には「貴重な抗体であれば回収して再利用することも検討する」と書かれています。

ウエスタン解析ではアザイドを入れて5回くらいふつうに使いまわしますし、免染でアザイドを加えなかったとしても汚染がなければ最低でも2-3回は使えそうな気がします。

免染抗体の使い回し 削除/引用
No.1770-1 - 2009/12/16 (水) 14:20:15 - pleco
免疫染色の抗体について質問です。

PBSで1:50程度に希釈して、一度染色に使用した一次抗体って
回収して再利用できますか?
「抗体による」「やってみないとわからない」かもしれませんが、
どなたかされている方がいれば(全く不可能でなければ)
試してみようと思い、質問させていただきました。

その場合、4℃でどれくらい持つのか、
参考までに経験談を教えて頂けるとうれしいです。
よろしくお願いします。

7件 ( 1 〜 7 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を