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ありがとうございます２ 削除/引用 No.1717-7 - 2009/12/10 (木) 05:32:45 - わ 透析に特殊な装置が要るものだと思い違いしていました。 あかねさんに紹介していただいたチューブを購入してやってみようと思います。 みなさま、ありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.1717-5 - 2009/12/09 (水) 23:30:40 - あかね 特殊な装置は必要ありません。 ビーカーにbufferを入れて、透析チューブを浮かせればいいだけです。 他の方がsuggestしているように、私も透析をオススメします。 以下参照 http://www.n-genetics.com/product/catalog.php?index_id=9&product_id=38&category_id=261&goods_id=3406

ありがとうございます 削除/引用 No.1717-4 - 2009/12/09 (水) 23:17:23 - わ 透析でやっておられるのですか。 所属研究室に透析の装置（？）が無く、どうにか限外ろ過でできないかと考えているんですが・・・

(無題) 削除/引用 No.1717-3 - 2009/12/09 (水) 11:24:03 - MDS 私も透析します。 150 ugは少ないですし、げんがいろかではlossも大きいでしょう

透析は？ 削除/引用 No.1717-2 - 2009/12/09 (水) 03:07:36 - かん ふつうに、置換したいバッファーを使って透析をし、その後濃度が薄ければcentriconなどで遠心濃縮をするというのはだめでしょうか？

抗体溶液のbuffer交換（Amicon)がうまくいきません 削除/引用 No.1717-1 - 2009/12/09 (水) 01:40:10 - わ 表題について非常に困っており、みなさまのアドバイスを頂戴したく、投稿しました。 現在、抗体（mouse IgG3）のRI標識反応のために、0.1M borate buf.(pH8.5)へのbuffer交換を、Amiconによる限外ろ過にて行っています。（以下は簡単な方法です） Protein Aカラムにて抗体(150ug程度)を精製（抗体溶出はpH4 citrateにて。溶出後、すぐに中和しています） ↓ Amicon(30k,4mL)上部に中和後の精製抗体溶液＋borate buf.(pH8.5)を加え、遠心(4℃、3500rpm、15min) ↓ Amicon上部に残っている溶液を抗体溶液とする しかし、抗体溶液とborate buf.を混ぜた時点で抗体の凝集体と思しきもの( 白い不溶性？のもの）が若干見られ、遠心後で溶液がAmicon下部に落ちにくく、また、タンパク量が充分に回収できていない、という状況なのです。 今のところ �@borate bufを0.2um filterでろ過し直し、ゴミ等を除去 �Abuffer交換に用いるbufferのpHを、徐々に8.5へと近づけていく（Amicon限外ろ過1回目でpH8.0、2回目でpH8.2、のように） といった方法を試してみたのですが、 �@効果なし、�ApH8.5にした時点で、結局ダメ といった感じでした。 何か改善点等あれば教えてください。お願いします。

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