卒業研究を行っている者です。
お恥ずかしい質問で恐縮ですが、transwell assayについて
お尋ねしたいことがあります。
transwell assayを用いて細胞の遊走能を調べているのですが、
遊走後の細胞を染色し、観察した結果、遊走にムラがあり、
メンブレン全体に、一様に細胞が遊走しません。
どのように実験系で行われていますでしょうか。
また、統計をとるには、視野中にどの程度細胞が遊走していればよいのでしょうか。イメージしていたよりも、遊走している細胞が少なくて困っています。
使用している細胞は、NIH3T3で、1.0×10^5個播種しています。
また、チャンバーの上室には5%FBS、チャンバー下室には20%FBSを
加え、約24時間インキュベート(37℃、5%CO2)しています。
ご教授お願いします。 |
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