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(無題) 削除/引用 No.1691-4 - 2009/12/08 (火) 00:56:27 - KR CJさん、SYさん、貴重なお時間をありがとうございます。２−３ミリでもWholeでもかわらなく、Wholeのほうが状態がよいということであれば、Whole brain でやってみたいと思います。とても参考になりました。本当にありがとうございます。

(無題) 削除/引用 No.1691-3 - 2009/12/07 (月) 08:32:51 - CJ ２−３ミリのスライスとホールブレインでは殆ど差がないと思います。 というより、後固定はそれほど重要なステップではなく、最初の潅流固定の良し悪しが全てを決定します。

(無題) 削除/引用 No.1691-2 - 2009/12/05 (土) 15:48:06 - SY 両方の後固定を行っています。 断然wholeでやったほうがサンプルの具合はいいように感じます。 スライスしたものを保存すると染色が芳しくないように個人的には思います。 だいたい後固定の時間は〜24時間ぐらいでやってます。 ほとんど放置しているような状態で。。。。 染色に影響はまったくありません。 もちろん標的物質によって違いがあるとは思いますが。

脳の免疫組織染色サンプル作製方法 削除/引用 No.1691-1 - 2009/12/05 (土) 01:06:20 - KR いつもお世話になっております。 脳の免疫組織染色サンプル作製方法について、ご意見いただきたいと思います。 私はマウスおよびラットを4％PFAで灌流固定後、脳を取り出し、Brain Matrixを使用して2-3mmにカットした後に、再び4％PFAで2-3時間、後固定、その後、sucroseという方法を行っております。Brain Matrixを使用して2-3mmにカットする際に常に同じ位置でカットするように心がけますが、やはりややずれることがあります。 そこで、より正確に比較を行いたいと思い、カットせず、Whole Brain の状態で後固定等を試してみたいと思っているのですが、その際、どのくらいの時間、後固定を行ったらよいのか（マウスとラットで異なるとも思いますので、その辺も含めて）アドバイスをいただきたいと思います。 もし、カットする方法とWhole Brain の方法を比較したことがある方がしましたら、その経験を教えてもらえると幸いです。おそらくカットする場合とWhole Brain の場合だと固定の状況も違ってくると思うので、染色の条件も違うのかなと推察しています・・・。宜しくお願いいたします。

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