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RNA精製キット トピック削除
No.1681-TOPIC - 2009/12/04 (金) 14:50:19 - RNA
培養細胞からのRNA抽出用に、スピンカラムタイプでDNAコンミが少なく、低価格なRNA精製キットを探しています。

・有機系よりカラムタイプが良いです。
・シングルエクソンジーンを対象としたqPCRを行うので、ゲノムのコンタミは極力避けたいです。(DnaseI処理必要な場合はDnaseIが添付されているほうがbetter)
・ルーチンでこれからも使いたいので低価格が良いです。

各社いろいろ出しているのですが、使用感などご教示いただけると幸甚です。
 
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No.1681-9 - 2009/12/06 (日) 02:56:26 - Tb
Zymo ResearchのQuick-RNA (Micro/Mini)はかなり安いので気にしてます(Micro 50 prepで日本\25,000、US $142)(比較対照のQIAGEN RNeasy Microは日本\49,500、US $354)。2-MEいらずで手順もRNeasyと同じようです。
でも、乗り換えはまだしていないので、使ったことがある方がいれば感想を教えてください。

(無題) 削除/引用
No.1681-8 - 2009/12/05 (土) 19:18:04 - Pumpkin
私もRNeasy(QIAGEN)です。

いずれのカラムにせよ、ザンギ様の仰るとおり、DNase処理とそれの結果を-RTなどのネガコンで評価することは絶対と思います。

(無題) 削除/引用
No.1681-7 - 2009/12/05 (土) 18:43:50 - RNA
みなさま。
貴重な情報ありがとうございます。

今のところ
RNeasy Plus Mini Kit
NucleoSpin® RNA II
GEのカラム

の名前があがっていますが
Takaraのカラムはいかがでしょうか?
DNase別売りですが、カラムだけでも極めてDNAのコンタミが少ないとうたっているので、実際いかがなものかと興味があります。
(なんとなく個人的にTakara好きのところもあるので(笑))

価格等はこれからもう少し調べてみます。
候補が出揃ってきたら一度このあたりのサンプル集めて比較してみようかなぁ...
他によさそうなものなどありましたら引き続き情報お願いします。

(無題) 削除/引用
No.1681-6 - 2009/12/05 (土) 10:55:01 - おお
>[Re:5] おおさんは書きました :

> あとアジレントがDNaseを使わなくても精製できるカラム
> のキットを売っていいたと思いますが使ったことはない
> です。


すいません小分けですが、
アジレントのはリアルタイムPCRを念頭において
キットを製造するようになったそうなので、
アジレントいわく、DNAのコンタミはないと
いっていました。ゲノムとかだと除きやすいかも
しないけど、例えば細胞に一過性にトランスフェクション
したプラスミドはどう?ってきいたら、答えに困ってました。

(無題) 削除/引用
No.1681-5 - 2009/12/05 (土) 10:49:32 - おお
GEのカラムをつかってます。オンカラムでDNAを消化するたいぷです。
キアーゲンの昔のやつを使っていた
こともあるのですが、DNaseが別売りで結構高くつくので
へんこうしました。GEはキットについてきます。

あとアジレントがDNaseを使わなくても精製できるカラム
のキットを売っていいたと思いますが使ったことはない
です。

(無題) 削除/引用
No.1681-4 - 2009/12/04 (金) 23:47:22 - ザンギ
RNeasy PlusはカラムでDNAを減らすステップがあるので、DNaseだけよりは
有効な気がして使っています。
でも残存DNAはゼロにはできませんから、ちゃんと評価できるようにしておく
ほうが大事かと思います。

自分が使用しているのは 削除/引用
No.1681-3 - 2009/12/04 (金) 22:48:49 - 悪地蔵
日本ジェネティクスのNucleoSpin® RNA IIを使用しています。

DNaseIがキットに入っています。
日本ジェネティクスは結構サンプルも出してくれます。

qPCR, マイクロアレイ(Agilent)に使用しましたが、問題無く
使用出来ています。
(出発サンプルが多すぎないように注意すれば、
シングルエクソンジーンのqPCRでも問題無く出来ていました。)

キャンペーン時にはかなり値引きされるので、お得感があります。

ご参考までに。

(無題) 削除/引用
No.1681-2 - 2009/12/04 (金) 22:48:35 - RNA
RNeasy Plus Mini KitでゲノムDNAの除去が出来て、RNAの精製が出来ます。

RNA精製キット 削除/引用
No.1681-1 - 2009/12/04 (金) 14:50:19 - RNA
培養細胞からのRNA抽出用に、スピンカラムタイプでDNAコンミが少なく、低価格なRNA精製キットを探しています。

・有機系よりカラムタイプが良いです。
・シングルエクソンジーンを対象としたqPCRを行うので、ゲノムのコンタミは極力避けたいです。(DnaseI処理必要な場合はDnaseIが添付されているほうがbetter)
・ルーチンでこれからも使いたいので低価格が良いです。

各社いろいろ出しているのですが、使用感などご教示いただけると幸甚です。

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