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sds−pageのサンプルバッファーについて トピック削除
No.1673-TOPIC - 2009/12/03 (木) 11:20:32 - ウコン 
×2サンプルバッファーで溶けないサンプルの場合、更に×4サンプルバッファーを混ぜたりしたらタンパクが溶けますでしょうか??
 
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(無題) 削除/引用
No.1673-3 - 2009/12/04 (金) 01:02:57 - おお
尿素を使うと溶解度が増すことがあります。
尿素分解産物によるタンパクの修飾を避けるために
サンプルバッファーで溶解してボイルしたあとに
飽和したフレッシュな尿素溶液を同量加えるといいかと思います。

若干の塩を加えると助けになることもあると思いますが
SDSPAGEの分解能がおちる可能性がありますのでそのへんを
考慮しながらいろいろやってみるといいかと思います。

どうしても塩濃度が高い方がいいという場合には
TRIS-TRICINEのバッファーシステムであれば分解能は
改善されると思います。またTRISーGLYCINEの場合で
あれば下のゲルのバッファー(tris-HCL、pH8.8)の濃度を2倍
にすると改善されます。

SDSの濃度を上げて溶解度が上がることはあると思いますけど
物によるということでどれもパーフェクトとはいえない
と思いますので、複数の解決方法をあげておきました。

(無題) 削除/引用
No.1673-2 - 2009/12/03 (木) 11:46:05 - TS
ものによりますので、やってみないとわからないと思います。
でも結構難しい気がします。
確認ですが、溶けていないものは、本当にタンパク質なんでしょうか?

sds−pageのサンプルバッファーについて 削除/引用
No.1673-1 - 2009/12/03 (木) 11:20:32 - ウコン 
×2サンプルバッファーで溶けないサンプルの場合、更に×4サンプルバッファーを混ぜたりしたらタンパクが溶けますでしょうか??

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