尿素を使うと溶解度が増すことがあります。
尿素分解産物によるタンパクの修飾を避けるために
サンプルバッファーで溶解してボイルしたあとに
飽和したフレッシュな尿素溶液を同量加えるといいかと思います。
若干の塩を加えると助けになることもあると思いますが
SDSPAGEの分解能がおちる可能性がありますのでそのへんを
考慮しながらいろいろやってみるといいかと思います。
どうしても塩濃度が高い方がいいという場合には
TRIS-TRICINEのバッファーシステムであれば分解能は
改善されると思います。またTRISーGLYCINEの場合で
あれば下のゲルのバッファー(tris-HCL、pH8.8)の濃度を2倍
にすると改善されます。
SDSの濃度を上げて溶解度が上がることはあると思いますけど
物によるということでどれもパーフェクトとはいえない
と思いますので、複数の解決方法をあげておきました。 |
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