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(無題) 削除/引用 No.1631-5 - 2009/11/27 (金) 14:57:09 - つん みなさま、ありがとうございます。 目的遺伝子の発現プラスミドを購入したらコントロール用としてGFPがのってるプラスミドがついていたので、こちらも同時に作っています。 文献などをみていて、空ベクターを使用するのが一般的なのかと思っていたため、GFPがのっていていいのかな？というのが最初の疑問でした。 過剰なGFPが何か悪さしないのか… コントロール用の細胞は、薬剤耐性を示し形態や増殖に異常がなさそうなクローンを選べばよいのでしょうか？ つくっていてふと思ったのですが、 目的遺伝子の発現プラスミドを導入し、薬剤耐性を示したけど目的遺伝子は発現していなかったクローン（形態、増殖に異常なし）をコントロールとしてはいけないのでしょうか？ 薬剤耐性を獲得し、過酷な条件をクリアしてきたクローンという点では、空ベクターを導入した場合とさほど変わらないような気がしたのですが…。

(無題) 削除/引用 No.1631-4 - 2009/11/27 (金) 13:06:36 - c 空ベクター導入細胞を使ってます。非導入細胞をコントロールとしてる論文もみたことあるし、たぶん人によっていろいろと思います。本質的に問題なければそれでもいいのかもしれないですが、査読でレフェリーに何か言われて作るのも面倒ですから、はじめから用意した方がいいと思います。

(無題) 削除/引用 No.1631-3 - 2009/11/27 (金) 09:54:08 - み 空ベクターのstableです。 cloning作業は細胞にとっては過酷な条件ですし、長期培養、クローナリティーの問題、薬剤耐性の有無など、parentとは条件が違い過ぎます。 空・興味遺伝子ともに複数クローンについて検討しましょう。

(無題) 削除/引用 No.1631-2 - 2009/11/26 (木) 17:40:52 - MP 空ベクターでしょうね。 GFPを使う事もあります。

stable cell lineのコントロール 削除/引用 No.1631-1 - 2009/11/26 (木) 16:02:13 - つん 自分で作製したStable cell lineを用いて実験をする場合、コントロールはどうしますか？ normalな細胞と比較？ 空ベクターをトランスフェクションした細胞？

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