いつも勉強させていただいてます。
現在、出芽酵母からのプラスミド抽出を行っています。
通常、プラスミド抽出では破砕用バッファーとビーズを加えて破砕機で破砕するというのが一般的な方法だと思います。
しかし、当研究室には高性能の破砕機がなく(元々酵母を扱う研究室ではなかったので)、この方法ではうまくいきませんでした。
そこで凍結破砕を試みたところうまくいったので現在この方法を採用しているのですが、サンプル数も多く非常に面倒な作業です。
なにか大腸菌のアルカリ溶菌法のように簡単にプラスミドが抽出できる方法はないでしょうか。
抽出したプラスミドは大腸菌へのトラフォメに用いるだけですので、粗精製でかまいません。
また、資金的にもそれほど恵まれた研究室ではないので、できればkitやザイモリアーゼ等を使用しない方法がいいです。
いろいろとすみませんが、皆様の知識を貸してください。 |
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