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(無題) 削除/引用 No.1587-10 - 2009/11/25 (水) 20:20:58 - Schwein >>CJさん 仰るとおり、経験上ウェスタンで使えても免染で使えなかった(賦活化等含む)抗体は多々ありますね。 まずは、カタログの適用欄を参照して、手元に抗体があるのであれば、組織染色に使えるか調べてみては？抗体は高いし…と、言いたかったのですが言葉足らずでした。

(無題) 削除/引用 No.1587-8 - 2009/11/25 (水) 19:27:53 - CJ ウエスタンで動く抗体が免疫組織化学に動くのか？というてんで、ＧＦＰの場合は結構厄介な事情があると思います。私の知っている良く動くＧＦＰ抗体の場合、１つは免疫組織化学に有効であり、ウエスタンは動きません。もう１つはウエスタンで動き、免疫組織化学を行う場合熱変性させる必要があります（前者の抗体は熱変性したＧＦＰに反応しません）。 このように、どうもＧＦＰの抗体には３次元構造に敏感なものが多いのではないか？という印象を持っています。よって、ウエスタンで使用した抗体が免疫組織化学に使えるとは安易に言い切れないです。

(無題) 削除/引用 No.1587-7 - 2009/11/25 (水) 18:31:20 - Schwein 横レスですみませんが、 >Westernblotを行った昔の先輩はマウスの抗体を利用しています。 明視野での観察なら、昔の先輩と同じものを使えばよいと思います。 抗体は当たりはずれがあるので。

(無題) 削除/引用 No.1587-6 - 2009/11/24 (火) 18:31:46 - CJ それをいうならkitでしょう。 バッファーは普通は自作するんじゃないでしょうかね？簡単ですよ。 使用するのは ＰＢＳ（リン酸生食） 正常血清 Triton X 100 2次抗体（ビオチン化抗体か、蛍光抗体） （もし明視野染色するなら）ＡＢＣキット(Vector Laboratories) など。

(無題) 削除/引用 No.1587-5 - 2009/11/24 (火) 14:27:00 - 超初心者 バッファーなどのことを伺いたかったのですが。。 まとめてKidとして売られているものではないのでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.1587-4 - 2009/11/24 (火) 10:54:21 - CJ すみませんが、Kidとは？

(無題) 削除/引用 No.1587-3 - 2009/11/24 (火) 10:21:04 - 超初心者 CJさんコメントありがとうございます。 ナカライの抗体をご使用だということですが、Kidの方はどこのものをお使いでしょうか？ よろしければお聞かせください。

(無題) 削除/引用 No.1587-2 - 2009/11/19 (木) 11:09:38 - CJ プロトコルについては過去ログを参考にしてみてください。 ＧＦＰの抗体はいろいろでていますね。 私はナカライのrat anti-GFPを使ってよい結果を得ましたが、他にもよい抗体はたくさんあると思います。

免疫組織染色 削除/引用 No.1587-1 - 2009/11/18 (水) 20:58:50 - 超初心者 免疫組織染色をしてい人が周りにいません。 詳しいプロトコルを教えていただけませんでしょうか？ 対象はGFPタンパク質を持つ組替え植物（幅１mm以下）で、GFP蛍光と自己蛍光の識別が目的です。 Westernblotを行った昔の先輩はマウスの抗体を利用しています。しかし、マウスのGFP抗体でもいくつか種類があり、選択基準が分かりません。 右も左も分からない状態です。どうかご指導お願いいたします。

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