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(無題) 削除/引用 No.1582-5 - 2009/11/17 (火) 20:38:49 - nanasi バイオラッド社から ・濃縮ゲル・分離ゲル用の濃度とｐHをを調整済みのTris塩酸バッファー（実験者はSDSを加えて溶かすだけ） ・10×トリス/グリシン/SDS バッファー が、出ています。 別に私はメーカーの回し者じゃありませんけど・・・これらを使って一度検証されることをおすすめします。 これでうまくいかなければバッファーの問題ではなく、30%アクリルアミドストック溶液やAPSやTEMEDでの重合時に問題があると判断できます。

(無題) 削除/引用 No.1582-4 - 2009/11/17 (火) 20:20:55 - ぷうたん Tris塩酸の濃度もかくべき

(無題) 削除/引用 No.1582-3 - 2009/11/17 (火) 20:18:43 - ぷうたん R-Gel miliQ/3mL,30%acrylamide/2mL,Tris塩酸pH8.8/2.7mL,10%SDS/0.8mL/10%APS/0.8mL,TEMED0/5.6uL 500V20mA2h 10 % APC入れ過ぎじゃね

補足 削除/引用 No.1582-2 - 2009/11/17 (火) 20:11:17 - ピペット ウェルにサンプルを２０uL,マーカーは１０uL入れていて、空ウェルにはＴｒｉｓ塩酸バッファーを入れています。 泳動バッファーの組成 Tris/30ｇ,グリシン145g,ＳＤＳ10g,miliQ/1L

ＳＤＳ−Ｐａｇｅ 削除/引用 No.1582-1 - 2009/11/17 (火) 20:01:52 - ピペット こんにちは。いつもこちらでお世話になっている学生です。 現在、ＳＤＳ−Ｐａｇｅに挑戦しているんですが、何度やってもうまく泳動されません。 マーカーのバンドが泳動されすぎて、一番重いマーカーのバンドがゲルの中央まで泳動されて、小〜中の分子量のバンドがゲルの下の方で団子状に固まってしまいます。 マーカーがきちんと泳動されていないということは、ゲルかバッファーに問題があるのかと考えているのですが、どんな問題が予想されるでしょうか？ 先生や先輩に聞いても解決しませんでした。 泳動条件 R-Gel miliQ/3mL,30%acrylamide/2mL,Tris塩酸pH8.8/2.7mL,10%SDS/0.8mL/10%APS/0.8mL,TEMED0/5.6uL 500V20mA2h S-Gel miliQ/1.7mL,30%acrylamide/0.4mL,Tris塩酸pH6.8/0.3mL,10%SDS/0.025mL/10%APS/0.025mL,TEMED0/2.5uL 500v10mA2h

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