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SH基アフィニティーカラムの作製について トピック削除
No.1571-TOPIC - 2009/11/16 (月) 12:27:21 - nnnnn
はじめまして。
SH基をトラップするアフィニティーカラムの作製を計画しているものです。

現在、私の研究室にある物を駆使し作製できないかと考えており、
以下の方法で上手く行くかどうか、
皆さんの客観的な意見をお聞きしたくトピックを立てました。

市販されているNH2基トラップカラムに
エチレンジアミンの片方のNH2基を架橋させ
もう一方のNH2基にMBS(架橋剤)を反応
そのMBSを解してSH基をトラップする
といった方法です。

ご意見よろしくお願いします。
 
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思いつき 削除/引用
No.1571-3 - 2009/11/17 (火) 00:06:27 - 笑い男
NH2-(CH2)n-SH を反応させたら、ゲルに【―SH】を導入できないかなー?
導入できれば R-S-S-R' でトラップ出来ないかなー?

エチレンジアミンからマレイミドもいけるような気がします。(あくまで客観的な意見ですよ!)

ただ、マレイミドの導入効率というのか、SHトラップ効率というのか・・純正SHトラップ樹脂を購入するコスト&安心感を取るのか、手持ちで自作して(新たなお金を使わず)不安を残すか・・・ 悩むなー。

(無題) 削除/引用
No.1571-2 - 2009/11/16 (月) 23:15:33 - z
>SH基をトラップするアフィニティーカラム
とは、SH化合物を除去する目的で使用されるのですね。

アミノヘキシルセファロースに直接MBSでも良いような気もしますが、「手持ちの試薬」の都合でしたら、それも結構かもしれません。
いずれにしても、MBSが難溶性ですから、MBSカップリングの後でfreeのMBSを取り除く必要がありそうです。マレイミド基を殺さないままでの洗浄条件が、少し不安です。
この担体だと、還元型のSH化合物しかトラップできないはずですが、その点はよろしいのでしょうか?

既にご承知かもしれませんが、SH化合物を対象にしたaffinity chromatographyには、チオールセファロースやチオプロピルセファロースを用いたコバレントクロマトグラフィーがあります。チオールペプチドを精製する時などに利用できると言っております。GEあたりで調べてみられると何か出てくるかもしれません。

SH基アフィニティーカラムの作製について 削除/引用
No.1571-1 - 2009/11/16 (月) 12:27:21 - nnnnn
はじめまして。
SH基をトラップするアフィニティーカラムの作製を計画しているものです。

現在、私の研究室にある物を駆使し作製できないかと考えており、
以下の方法で上手く行くかどうか、
皆さんの客観的な意見をお聞きしたくトピックを立てました。

市販されているNH2基トラップカラムに
エチレンジアミンの片方のNH2基を架橋させ
もう一方のNH2基にMBS(架橋剤)を反応
そのMBSを解してSH基をトラップする
といった方法です。

ご意見よろしくお願いします。

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