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ありがとうございます 削除/引用 No.1522-5 - 2009/11/11 (水) 12:57:42 - ふくおか z様ありがとうございます。 なるほど。アグる直前にコートさせようという魂胆ですね。界面活性剤でも同じように希釈してアグる直前にコートさせることを考えてました。いずれにしてもいろいろ試さないとだめですねえ。頑張ってみます。

(無題) 削除/引用 No.1522-4 - 2009/11/11 (水) 09:19:56 - z 想像だけですけど、 タンパク溶液を界面活性剤から8M Ureaか6M グアニジンに変えて、タンパクをできるだけ濃く調整して、PBSで100x程度に希釈して、一気にプレートコートするのが良いかもしれません。 希釈するチューブは、あらかじめシラナイズするか、逆にBSAコートしておく必要があるかもしれません。

ありがとうございます。 削除/引用 No.1522-3 - 2009/11/10 (火) 12:40:43 - ふくおか おお様。ありがとうございます。 そうですね。塩濃度は結構重要のような気がしますね。吸着の際にタンパクと競合しそうです。 今回TritonX-100とデオキシコール酸ナトリウムの二つを試すのですが、後者はイオン性なので、だめかも知れませんね。 検出は確かにどうしたら良いのだろう？RIラベルしていれば簡単にできそうですが、今回はしてません。細胞の反応でとりあえず見てみます。

(無題) 削除/引用 No.1522-2 - 2009/11/10 (火) 11:59:24 - おお 確か培養用のプレートは表面電荷を持たせてあると思うので、 つくかもしれないなぁってちょっと思ってますが、 確かにデタージェントではがれるようなイメージも ありますね。電荷による吸着を強めるのであれば 塩濃度を下げた方がいいです。ですから非イオン性の デタージェントなら望みがあるかもと、、、、 溶液をのせて乾かすと吸着は強くなる可能性は ありますけど、むらができるかもしれません。 あとはタンパクの 濃度とか、どの程度のタンパクがついている必要が あるかとか、、、そういうのによるでしょう。 しかしどうやってついたかどうか確認するのが いいんだろう、、、、、

界面活性剤で可溶化しているタンパクをコーティング 削除/引用 No.1522-1 - 2009/11/09 (月) 21:17:22 - ふくおか いつもお世話になっています。 いまあるタンパクを界面活性剤で可溶化しております。これを培養用のプレートにコーティングしたいと思っているのですが、そのままコーティングして、洗い流して使うことは可能でしょうか？界面活性剤だけに、タンパクも流れてしまいそうな気がするのですが、そのようなご経験のある方はおられますでしょうか？

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