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C2C12細胞株について トピック削除
No.1478-TOPIC - 2009/11/04 (水) 13:40:41 - ゴー
初めて質問させていただきます。

C2C12(マウス筋芽細胞)という細胞株を培養中なのですが、
これは、条件を変えることにより、骨芽細胞や筋管になることが
知られていますが、私がそれらに分化させようとしても
3割くらいの細胞しか分化してくれません。

どのようなことが原因だと考えられますか?
ご存知の方がいらっしゃいましたら、是非教えていただければ幸いです。

どうぞよろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.1478-4 - 2009/11/04 (水) 15:43:44 - c
別の筋芽細胞ですが、長く継代していると次第に分化しにくくなるようです。血清濃度を下げて分化させていますが、樹立当初は通常の培養条件でも容易に分化したらしいです。10ー14日程度培養すれば太い筋管ができるまでは何とか行きますがすべての細胞がなるまではいきません(50−60%くらいか?)。自律収縮運動が観察されるのはもっと少ないです(1割くらい)。樹立当時と比べると明らかに分化しにくくなっているようです。少し面倒ですがクローニングしていくつかクローンをひろって、比較的分化しやすいものを選んで増やすのがよいと思います。またできるだけ分裂回数を少なくするように、少し増やしたらストックして凍結保存するとか、細胞濃度を薄く撒かないとか言った注意も必要でしょう。(磁場かなにかで)分化を促進するような方法も最近報告されているようです。

(無題) 削除/引用
No.1478-3 - 2009/11/04 (水) 14:49:33 - おお
どんな条件を使ってるのか書かないと
答えにくいと思うんですけど、、、、

3割というのは何を指標にしてますでしょうか、、、、


それとその手元にある細胞(バッチ)はあなたの研究室の
だれかほかの人が(昔とかに)使っていて分化していた
ものですか?

何も考えずにどこかからルーチンに分化させているラボ
から譲ってもらうのもてかもしれません。

(無題) 削除/引用
No.1478-2 - 2009/11/04 (水) 13:51:57 - p
細胞の飼い方が下手とか。

C2C12細胞株について 削除/引用
No.1478-1 - 2009/11/04 (水) 13:40:41 - ゴー
初めて質問させていただきます。

C2C12(マウス筋芽細胞)という細胞株を培養中なのですが、
これは、条件を変えることにより、骨芽細胞や筋管になることが
知られていますが、私がそれらに分化させようとしても
3割くらいの細胞しか分化してくれません。

どのようなことが原因だと考えられますか?
ご存知の方がいらっしゃいましたら、是非教えていただければ幸いです。

どうぞよろしくお願いします。

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