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(無題) 削除/引用 No.1450-8 - 2009/11/03 (火) 09:13:09 - GE 皆様 お返事遅くなり申し訳ありません。 バイオラッドの方は、いい感触のようですね。P様の意見に惹かれています。 出入りの業者の方にも意見を聞いたところ、バイオラッドについてはいい意見を頂きました。 とりあえず、業者の方に両方のサンプルを交渉しようと思います。 皆様、貴重な意見をありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.1450-7 - 2009/11/01 (日) 15:31:39 - み >[Re:6] pさんは書きました : > バイオラッドのドデカを使用して自前でMSしています。 > ドデカはバックグラウンドの低さ、作業の簡便さ、感度の高さ、いずれも極めて優秀です。実験をはじめたばかりの方でも熟練のような結果が得られています。 ドデカに乗り換えようっと。 あっ　トピ主にアドバイスとしては両者の試供品取り寄せるのも手かな(可能かどうか知らぬが）。

(無題) 削除/引用 No.1450-6 - 2009/11/01 (日) 15:11:36 - p バイオラッドのドデカを使用して自前でMSしています。 ドデカはバックグラウンドの低さ、作業の簡便さ、感度の高さ、いずれも極めて優秀です。実験をはじめたばかりの方でも熟練のような結果が得られています。

(無題) 削除/引用 No.1450-5 - 2009/11/01 (日) 14:49:39 - み 一応反論。 インビトロジェンのsilverquetで染色したバンドを10本くらいマス同定した経験あり。 銀染プロトコールは一般的なものと遜色なく簡単。 ケラチンのコンタミは実験環境(ゲルが市販か手製か？サンプルバッファーはその都度調製し直いているか？ゲル切り出しをドラフト内などでやってるか？など）によって異なり、薄いバンドの時はケラチンのシグナルに隠れて同定不能になる。 でも濃いバンドだったら問題ない。 bioradのやつは経験無い。

(無題) 削除/引用 No.1450-4 - 2009/11/01 (日) 14:42:58 - おお インビトロジェンを使っている人がいました。 感触はよかったみたいです。 具体的にはあまり知りませんけど。

(無題) 削除/引用 No.1450-3 - 2009/11/01 (日) 13:38:01 - GE Ｍさま お返事ありがとうございます。 私、銀染色は初めてなのですが、シルバークエスト銀染色キット（インビトロジェン）は、素人にとっては難しそうですね。。。 どなたか、バイオラッドの方の感想があれば、お教えいただきたいと思います。

(無題) 削除/引用 No.1450-2 - 2009/11/01 (日) 10:58:38 - Ｍ シルバークエスト銀染色キット（インビトロジェン）を使ったことがあります。 しかし、マスコンパチブルでも銀染色は染色過程での操作が多いためなのか、目的タンパクとケラチンの存在量比率やケラチンの性質（イオン化しやすい？）などのためなのか分かりませんが、素人には成功する確率が低いような気がしています。銀染色でしか見えないような超微量タンパクのマス解析を外注されるのであれば、SDS-PAGEから委託された方が賢明かと思います。 量的にネガティブ染色で検出できるようならば、こちらの方をお勧めします。

銀染色キット（インビトロジェン、バイオラッド） 削除/引用 No.1450-1 - 2009/10/30 (金) 17:37:33 - GE いつも勉強させてもらっています。 今回、皆様の意見を伺いたく書き込みました。 今度、未知蛋白質の同定をマスで行おうと思っています。 手法としては免疫沈降物をSDS-PAGEで泳動し、銀染色後に目的バンドを切り出し、マスにかける予定です。 マス解析は外部に委託するのですが、銀染色について聞いたところ、シルバークエスト銀染色キット（インビトロジェン）またはDodecaシルバーステインキット（バイオラッド）を薦めていただきました。 どちらを使おうか現在迷っております。そこでお伺いしたいのですが、どなたかこれらのキットを使用した感想を教えていただけないでしょうか？

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