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大腸菌で発現させたペプチド トピック削除
No.1442-TOPIC - 2009/10/29 (木) 19:28:56 - E.coli
ある疎水度の比較的高いペプチド(6kDa程)を大腸菌により発現させ、変性状態(つまりUrea入りの状態)で精製しました。精製ペプチドを水で透析し、沈殿させ、それを凍結乾燥しました。

このペプチドを少量のDMSOで溶解してから、希釈してある目的に(できれば水溶液の状態で)使用する計画でしたが、DMSOに溶けませんでした。

このような場合、他にどのような手が考えられるでしょうか?
 
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No.1442-6 - 2009/10/30 (金) 16:00:00 - E.coli
塩基性ペプチドだったためか、酸性溶液(pH 3)に溶かすことができました。

お騒がせいたしました。

ご助言くださった方々、ありがとうございます。

(無題) 削除/引用
No.1442-5 - 2009/10/30 (金) 14:07:40 - E.coli
皆様、ご助言ありがとうございます!一通り試してみます。

まずは、pHをいじってみるのが手っ取り早いですかね。

(無題) 削除/引用
No.1442-4 - 2009/10/30 (金) 05:08:51 - おお
DMFとかアルコールなんかがすぐにおもいつきますが。
水溶液でも塩濃度とかpHで劇的にかわったりすること
もあります。
たしかTGFbだったとおもいますが、凍結乾燥品を
うすいHClで溶解するというものもありました。

(無題) 削除/引用
No.1442-3 - 2009/10/29 (木) 21:14:55 - qq
ureaに溶解する。
タウリンに溶解してみる。
NDSB(2DーPAGEで使う)に溶解してみる。
リン脂質ベシクルで分散する。

(無題) 削除/引用
No.1442-2 - 2009/10/29 (木) 20:20:22 - ~
疎水性ペプチドをカラムで扱う際に、アセトニトリルや2プロパノールを遣っている例を見たことがあります。
溶媒を変えてみるのが早いと思いますが。

大腸菌で発現させたペプチド 削除/引用
No.1442-1 - 2009/10/29 (木) 19:28:56 - E.coli
ある疎水度の比較的高いペプチド(6kDa程)を大腸菌により発現させ、変性状態(つまりUrea入りの状態)で精製しました。精製ペプチドを水で透析し、沈殿させ、それを凍結乾燥しました。

このペプチドを少量のDMSOで溶解してから、希釈してある目的に(できれば水溶液の状態で)使用する計画でしたが、DMSOに溶けませんでした。

このような場合、他にどのような手が考えられるでしょうか?

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