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(無題) 削除/引用 No.1413-8 - 2009/10/28 (水) 22:01:45 - 頭痛 たくさんのアドバイスを頂き、ありがとうございました。 とても勉強になりました。 まだ成功していないのですが、トライしてみます。

(無題) 削除/引用 No.1413-7 - 2009/10/27 (火) 16:04:06 - たに 大腿骨を扱った私の場合ですが、脱灰はプランクリクロで室温30分くらい脱灰して触感で柔らかくなっていたら脱灰を中止します。15分くらいで一度、触ってみます、細いところは結構柔らかくなっています。中和は特にしなくとも大丈夫で、その後、通常の組織標本作製の手順で切片を作ります。ヘマトキシリンは、通常のマイヤーを使っています、染色時間は7分です。 プランクリクロの作り方のプロトコルは公開されていますのでその方法に従って作れば十分です。 和光純薬からも出来合いがありますんで、それを買ってもいいです。ヘマトキシリンは自家製でもいいです。また、サクラファインティックで扱っています、ティシュー・テックのヘマトキシリン3Gはお勧めです（500mlで5,000円）。 うまくいくことを祈ります、あ、コントロールに一般臓器を必ず一緒に染めましょう。

(無題) 削除/引用 No.1413-6 - 2009/10/27 (火) 15:56:00 - hi まず、考えられるのは脱パラ不良のように思いますが…。 きちんと脱パラ、脱キシレンができていないのでは？ ちなみに組織は骨ですか？ EDTAであれば１週間くらいなら大丈夫なので過脱灰は考えにくいですが、マウスなら大腿骨でも２〜３日でも脱灰完了しますよ。

(無題) 削除/引用 No.1413-5 - 2009/10/27 (火) 14:11:06 - 頭痛 組織はマウスです。固定は４％ＰＦＡで数日、脱灰は、ＥＤＴＡにて1週間行いました。染色は、ギルのヘマトキシリンで通常２分、水洗後、エオシン30秒です。組織の自己融解や変性はみられないと思います。脱パラのキシレンは5分、4分の2回です。短くした方がよいでしょうか？もしも過脱灰だとするともう方法はないのでしょうか？引き続き、よろしくお願い致します。

(無題) 削除/引用 No.1413-4 - 2009/10/27 (火) 11:42:48 - ； ヘマトキシリンの種類にもいろいろありますが。。。

(無題) 削除/引用 No.1413-3 - 2009/10/27 (火) 10:08:30 - たに 組織の作成過程が分からないと、よいアドバイスができないのですが、組織は人ですか、動物ですか、固定は何を使って時間はどのくらいですか、組織は自己融解や変性はおこしていませんか（私の勤務する大学の系統解剖の組織はヘマトキシリンはまず染まらない）。 過脱灰ですが、プランクリクロでも3〜4日程度ならば大丈夫です。脱パラのキシレンは使い過ぎていませんか、などなど標本作製過程をちょっと見直してみて下さい。

(無題) 削除/引用 No.1413-2 - 2009/10/27 (火) 08:33:47 - CJ ヘマトキシリンではないですが、確かに好塩基色素が脱灰によって染まらなくなった経験があります。 その脱灰液はプランクライクロ液（塩酸と蟻酸の混合物）とかじゃないでしょうか？ＥＤＴＡによる脱灰だったらいけたような気が…

HE染色 削除/引用 No.1413-1 - 2009/10/27 (火) 04:43:18 - 頭痛 HE染色において、核がうまく染まりません。水洗、ヘマトキシリンの時間を長くする、ヘマトキシリンを再購入するなど試してみましたが、だめでした。可能性として過脱灰も考えられるのですが（組織によっては染まる為）、その場合、何か良い方法はありますでしょうか？

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