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in situ hybridaization の切片に黒い斑点 トピック削除
No.1373-TOPIC - 2009/10/19 (月) 14:45:27 - 21207
ホールマウント in situ用として100%メタノール中4℃で長期保存していたマウス胚(E12.5)を、
8μmのパラフィン切片にしてDIGラベルRNAプローブを用いてセクションin situを行なうと、
切片全体に黒い小さな斑点が生じます。
原因と解決法をご存知の方、よろしくお願いします。
　
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(無題) 削除/引用
No.1373-3 - 2009/10/20 (火) 11:58:23 - CJ
ＪＨさんに1票。あと、洗いが悪くてもそうなります。

(無題) 削除/引用
No.1373-2 - 2009/10/20 (火) 10:04:07 - JH
NBT/BCIP発色でしょうか？　そうであればおそらくこれらの色素の結晶ではないかと思います。改善策の候補としては、発色液を使用する前にフィルターを通すことと、発色の温度を高めにすることが挙げられるかと思います。
ご参考になれば。

in situ hybridaization の切片に黒い斑点 削除/引用
No.1373-1 - 2009/10/19 (月) 14:45:27 - 21207
ホールマウント in situ用として100%メタノール中4℃で長期保存していたマウス胚(E12.5)を、
8μmのパラフィン切片にしてDIGラベルRNAプローブを用いてセクションin situを行なうと、
切片全体に黒い小さな斑点が生じます。
原因と解決法をご存知の方、よろしくお願いします。
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