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Biacoreを用いたタンパク質の検出について トピック削除
No.1361-TOPIC - 2009/10/16 (金) 16:30:37 - grima
タンパク質の精製においてアッセイ系としてBiacoreを利用しようと考えて
います。
組織からの粗抽出液をアナライトとして目的タンパク質とリガンドとの
特異的結合を観たいのですが可能でしょうか?
非特異的な結合が多そうでなかなか困難な気がしています。
自分で文献を調べた限りでは、タンパク質の精製でBiacoreを用いて
いるのは組換えタンパク質の場合だけでした。
組織に含まれるタンパク質の精製でBiacoreを使用している方、
もしくはそのような文献を知ってる方いらっしゃいましたら教えてください。
 
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(無題) 削除/引用
No.1361-4 - 2009/10/20 (火) 09:21:27 - カメラ
普通のとはどういうことでしょうか?

Biacoreにもいくつかあります。

私どもが使用しているBiacore3000は結合したものをMSで飛ばして同定することは可能です。

一度、あなたの使用可能なBiacoreがそういったことができるのか調べてみる必要があります。

(無題) 削除/引用
No.1361-3 - 2009/10/19 (月) 17:11:37 - grima
>>カメラさん

リガンドは純品です。

結合したもの(未知)をMSで飛ばして同定するのは普通のBiacoreでも
できるのでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.1361-2 - 2009/10/16 (金) 17:17:05 - カメラ
確認ですが、センサーチップに固定化するタンパクは純品ですよね?

私はアナライトとして血清を流したことがあります。

質問者さんの実験目的がよくわからないのですが、結合したもの(未知)をMSで飛ばしてリガンドを同定することは可能かと思いますが。

Biacoreを用いたタンパク質の検出について 削除/引用
No.1361-1 - 2009/10/16 (金) 16:30:37 - grima
タンパク質の精製においてアッセイ系としてBiacoreを利用しようと考えて
います。
組織からの粗抽出液をアナライトとして目的タンパク質とリガンドとの
特異的結合を観たいのですが可能でしょうか?
非特異的な結合が多そうでなかなか困難な気がしています。
自分で文献を調べた限りでは、タンパク質の精製でBiacoreを用いて
いるのは組換えタンパク質の場合だけでした。
組織に含まれるタンパク質の精製でBiacoreを使用している方、
もしくはそのような文献を知ってる方いらっしゃいましたら教えてください。

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