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(無題) 削除/引用 No.1332-2 - 2009/10/12 (月) 15:53:55 - み >[Re:1] 玉手箱さんは書きました : > > 細胞内の抗原を染色するため、2%PFAで固定した後、0.5%サポニンで透過して染色しています。教わった通りのプロトコールで染色しているのですが、抗体を反応させた後の洗浄にもこのサポニンを使って行っています。この洗浄にはPBSを使うべきなのでしょうか。 > サポニンのまま洗浄して抗体がとれてしまったのかと怪しんでいます。 > 教わった通りされているとのことですが、その手法で現在使用されている抗体によるシグナルは今までに得られていたのでしょうか？ それなら方法は問題ないということになりますよね。 それが不明なら教わった人に相談されるのがベストですよね。 washの時にサポニン無でも可能でしょう。そのくらいの試行錯誤は直ぐできますよね。

免疫染色でうまく染まらない 削除/引用 No.1332-1 - 2009/10/12 (月) 14:32:16 - 玉手箱 いつもお世話になっています。 免疫染色の初心者です。 今、培養細胞を免疫染色しているのですが、上手く染まらず、原因かと思われる点について質問させていただきました。 細胞内の抗原を染色するため、2%PFAで固定した後、0.5%サポニンで透過して染色しています。教わった通りのプロトコールで染色しているのですが、抗体を反応させた後の洗浄にもこのサポニンを使って行っています。この洗浄にはPBSを使うべきなのでしょうか。 サポニンのまま洗浄して抗体がとれてしまったのかと怪しんでいます。 基本的なことで申し訳なく思いますが、ご教授いただけたらと思います。

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