Bio Technical フォーラム

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マスタープレート上でのミューテーション トピック削除
No.1292-TOPIC - 2009/10/04 (日) 10:40:31 - take
プラスミドのコンストラクトで、出た大腸菌のコロニーを取ってマスタープレートを作り、当りのクローンを増やす時に使っていました。期限は大体１ヵ月と思っていましたが、今回ラボを移って、マスタープレート上でミューテーションが起こるので、作って１週間を超えたら使ってはいけないと指摘されました。初めて聞いたので、そうならこれまで大丈夫だったのだろうかと心配になっています。
　
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No.1292-4 - 2009/10/05 (月) 18:12:23 - take
レスありがとうございます。
いずれにせよ１週間以内の使うのが無難ということですね。
基本的な実験でも知らないことがまだまだあると反省しました。

(無題) 削除/引用
No.1292-3 - 2009/10/04 (日) 18:56:37 - コロ
大量に蛋白を大腸菌内で発現するプラスミドは選択圧がかかりダメになることが多いかもしれません。そうでないのとは区別して考えたほうがいいかも。

基本的にはすべてにおいてプラスミドで保存し、私は１週間を超えたら使わないですね。

(無題) 削除/引用
No.1292-2 - 2009/10/04 (日) 13:26:30 - ami
･･･質問は？

マスタープレート上でのミューテーション 削除/引用
No.1292-1 - 2009/10/04 (日) 10:40:31 - take
プラスミドのコンストラクトで、出た大腸菌のコロニーを取ってマスタープレートを作り、当りのクローンを増やす時に使っていました。期限は大体１ヵ月と思っていましたが、今回ラボを移って、マスタープレート上でミューテーションが起こるので、作って１週間を超えたら使ってはいけないと指摘されました。初めて聞いたので、そうならこれまで大丈夫だったのだろうかと心配になっています。
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