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No.1224-5 - 2009/09/21 (月) 01:40:04 - もんきち
>[Re:3] ねうろんさんは書きました :
> スメアはスメアなりに意味のある物だと思っています。
> 例えばDNAが汚いとか、アプライし過ぎ、染め過ぎ、exposeし過ぎとか。
> 他の方はもっと思いつくかもですが。
> どの辺りがどのようにスメアなのでしょうか?
>
> 因に私の同僚は、泳動し終えてから少し逆に流す(プラス極とマイナス極を変える)事でバンドがシャープになると言ってましたが、私自身試した事はありません。

ねうろん様

書き込みありがとうございます。

サンプルだけでなくマーカーもスメってしまいます。

師匠が泳動すると、きれいにバシっと出るのに、私が泳動をするとスメってしまいます。

師匠の作業を見せていただいたのですが、何が違うのかわかりませんでした。

染め方やexposeは師匠と同条件で行っております。

マーカーもスメっていることからサンプル調製が問題なのではなく、泳動行程で何かしらかの問題があるかと存じます。

なにかこつなどをご存じでしたらご教授くださいますようよろしくお願い申し上げます。

(無題) 削除/引用
No.1224-4 - 2009/09/21 (月) 01:36:49 - もんきち
>[Re:2] おおさんは書きました :
> ちょっと漠然過ぎですね、、、、、、
>
> マーカーもきれいに流れていませんか?
>
> まあちょっとした気遣い的なことで
> 綺麗になることはありますが、、、、

おお様

ありがとうございます。そしてもうしわけございません。

おっしゃるとおりマーカーもスメってしまうのです。

師匠は丁寧に作業すればきれいに流れると教えてくれたのですが、

どこをどうすれば丁寧な作業になるのかわからず、恥ずかしながら質問させていただきました。

ご指摘のちょっとした気遣いとは具体的にはどのようなことがあるのでしょうか?

ご教授くださいますようよろしくお願いいたします。

(無題) 削除/引用
No.1224-3 - 2009/09/19 (土) 06:19:31 - ねうろん
スメアはスメアなりに意味のある物だと思っています。
例えばDNAが汚いとか、アプライし過ぎ、染め過ぎ、exposeし過ぎとか。
他の方はもっと思いつくかもですが。
どの辺りがどのようにスメアなのでしょうか?

因に私の同僚は、泳動し終えてから少し逆に流す(プラス極とマイナス極を変える)事でバンドがシャープになると言ってましたが、私自身試した事はありません。

(無題) 削除/引用
No.1224-2 - 2009/09/19 (土) 05:40:29 - おお
ちょっと漠然過ぎですね、、、、、、

マーカーもきれいに流れていませんか?

まあちょっとした気遣い的なことで
綺麗になることはありますが、、、、

DANのアガロース電気泳動 削除/引用
No.1224-1 - 2009/09/19 (土) 01:28:10 - もんきち
いつも勉強させていただいております。

非常に初歩的な質問ですので、不適切なトピックでしたら管理人様消削除をお願いいたします。

DNAのアガロースゲルでの電気泳動の際、どのようにしたらバンドをばしっときれいに、流すことができるのでしょうか?

スメアを一切させずに流すための決定的な手法などがありましたら教えていただけますでしょうか?



 

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