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一次抗体 トピック削除
No.1201-TOPIC - 2009/09/15 (火) 11:21:37 - G
C. elegansを用いて、現在ウェスタンブロットによって発現量の変動をみようと考えているのですが、ローディングコントロールとして何を用いようか迷っています。
何かお勧めはないでしょうか?

C. elegansに用いることができるアクチン、tubulinの抗体などありました教えていただけないでしょうか?

お願い致します。
 
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No.1201-5 - 2009/09/24 (木) 00:29:58 - AP
抗体はメーカの能書きだけでは不安なところもあって、実際に、線虫でこの抗体が働きましたという情報があればいいのでしょうけれど、まだ自助努力の余地はあるんじゃないでしょうか。

・どう言う抗体を使ったのかというのは結構重要な情報なのでfull paperなら記述があるものだと思います。少なくとも、記載のある論文がひとつもないということはないはずなので、単純に文献漁りが足りないんじゃないでしょうか。記載がなくても論文を出した以上、著者には情報公開の義務がありますので、問い合わせれば教えてくれないということはないはずです。

・抗体製品のカタログ情報に、線虫への適用について記載されているものも少なくないです。現在ではインターネットの検索だけでかなりの情報があつまるはずです。たとえば、
ttp://www.scbt.com/ja/datasheet-9104-beta-tubulin-h-235-antibody.html
(↑線虫に使えます)
ttp://www.abcam.co.jp/beta-Tubulin-antibody-2-28-33-ab11311.html
(↑線虫には不適当)

・材料生物にspecificな問題なので線虫の研究者コミュニティで情報を求めたほうが具体的、実際的な情報がえられるのでは。
 ttp://www.wormjp.umin.jp/jp/index-j.html

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No.1201-4 - 2009/09/23 (水) 23:47:34 - G
cさん、abさんお答えいただきありがとうございます!

論文では、私が今まで見た論文ではtubulinが主に使用されているのですが、どこの製品なのか書かれていなかったのです。
もしお勧めの会社・製品がありましたら教えていただけないでしょうか?
また、ローディングコントロールを選ぶポイントなど、求められる特長がございましたら教えていただけないでしょうか?

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No.1201-3 - 2009/09/22 (火) 13:49:08 - c
現状ではC.elegansの蛋白質に対する抗体やC.elegansでの使用も想定して作られた抗体は非常に限られるとおもうので、おそらくヒトとかマウス/ラットとかに使う抗体を使用する事になるでしょう。とすると、種間で配列がかなりよく保存されている蛋白質ということになるとおもいます。アクチンやチューブリンがどの程度保存されているかいまはわかりません。ヒストンとかはかなりよく保存されているはずです。

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No.1201-2 - 2009/09/18 (金) 08:47:24 - ab
はじめまして
線虫でWBを行っているpaperはないんでしょうか?

そこに使用されているコントロールを用いたらどうでしょう?

一次抗体 削除/引用
No.1201-1 - 2009/09/15 (火) 11:21:37 - G
C. elegansを用いて、現在ウェスタンブロットによって発現量の変動をみようと考えているのですが、ローディングコントロールとして何を用いようか迷っています。
何かお勧めはないでしょうか?

C. elegansに用いることができるアクチン、tubulinの抗体などありました教えていただけないでしょうか?

お願い致します。

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