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HeLa細胞への遺伝子導入 トピック削除
No.1193-TOPIC - 2009/09/13 (日) 13:48:10 - ヒーラ
HeLa細胞への遺伝子導入方法として、キアゲンのスーパーフェクトを用いたのですが、うまくいきません。過去の報告では、使っている人もいるようなのですが。。
皆様はなにをつかってますでしょうか。。?
 
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No.1193-6 - 2009/09/16 (水) 17:05:09 - orz
入ってるけど発現してない
DNAが汚い
DNAのサイズが大きすぎる
に1票ずつ

FugeneHD 削除/引用
No.1193-5 - 2009/09/14 (月) 20:59:54 - かわさき
です。すごく良く入りますが、GFP発現プラスミドを使って、いつも40個ほどの条件を検討します。条件がまずいとどんな細胞でもはいりませんね。試薬メーカーの標準条件なんてぜんぜんあてになりません。細胞ごとにきちんと検討が必要です。

(無題) 削除/引用
No.1193-4 - 2009/09/14 (月) 09:49:07 - ~
主に、リン酸カルシウムを使っていました。
SperfectでHeLaに入れている報告は見かけますので、
貴方のやり方が疑わしいのですが…

どのような状態をうまくいかないと表現しているのでしょうか?
細胞が元気なまま入らないのでしょうか?
細胞が死んでしまうのでしょうか?

また、ラボとして遺伝子導入の経験はあるのでしょうか?
入る入らないの評価方法は妥当なのでしょうか?
HeLa以外の細胞株には入るのでしょうか?
他の試薬であれば入るのでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.1193-3 - 2009/09/13 (日) 14:59:40 - ami
・・・偽者が大量に出回って困ってますが、、IDが取れるような掲示板じゃないと仕方ないからなぁ、、、

入らないのは試薬のせいじゃないと思います。およそあまねくどんな試薬でも入ると思う。

(無題) 削除/引用
No.1193-2 - 2009/09/13 (日) 14:26:05 - ami
えっ

HeLa細胞への遺伝子導入 削除/引用
No.1193-1 - 2009/09/13 (日) 13:48:10 - ヒーラ
HeLa細胞への遺伝子導入方法として、キアゲンのスーパーフェクトを用いたのですが、うまくいきません。過去の報告では、使っている人もいるようなのですが。。
皆様はなにをつかってますでしょうか。。?

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