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生細胞の回収 トピック削除
No.119-TOPIC - 2009/03/02 (月) 07:13:04 - トライアル
最近細胞を扱い始めた初心者です。

現在ある浮遊系の細胞を扱っているのですが、大量の死んでいる細胞の中からごく少数の生きている細胞を回収するにはどのような方法が良いでしょうか。

ためしにFicollで遠心して取ろうとしたところロスが多く、ほとんど回収できませんでした。

スケールは10の9乗くらいの細胞から10の6乗程度の生細胞を取りたいと考えてます。セルソーターは近くにないので使えない状況です。

ご教授の程宜しくお願いします。
 
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MACSは 削除/引用
No.119-4 - 2009/03/05 (木) 10:32:09 - ema
Autoでも手でも良いのですがMACSは持ってませんか?
死亡細胞除去キットが有ると思うのです。とはいえ細胞の条件によっては分離してくれなくてだめなこともあります。
試せるならやってみでは。

(無題) 削除/引用
No.119-3 - 2009/03/03 (火) 00:28:47 - トライアル
お返事ありがとうございます。
扱っている細胞はマウスのリンパ球由来の株化細胞で、遠心には耐えられる細胞です。
細胞にある刺激を加えると殆どの細胞が死に、ごくわずかだけ生き残るのですが、その細胞をかき集めてきてウエスタンと酵素活性の測定をするのが目的です。
刺激後に生き残った細胞は増殖が止まるため、そこから増やすという方法は採れません。

(無題) 削除/引用
No.119-2 - 2009/03/02 (月) 09:21:46 - ~
生きている細胞を回収後どうしたいのでしょうか?
また、細胞株は何でしょうか?

増やそうとしていて、遠心に強い細胞であれば、
軽く遠心をかけて死細胞を除き、しばらく培養すれば生細胞の比率は増えていくでしょう。

生細胞の回収 削除/引用
No.119-1 - 2009/03/02 (月) 07:13:04 - トライアル
最近細胞を扱い始めた初心者です。

現在ある浮遊系の細胞を扱っているのですが、大量の死んでいる細胞の中からごく少数の生きている細胞を回収するにはどのような方法が良いでしょうか。

ためしにFicollで遠心して取ろうとしたところロスが多く、ほとんど回収できませんでした。

スケールは10の9乗くらいの細胞から10の6乗程度の生細胞を取りたいと考えてます。セルソーターは近くにないので使えない状況です。

ご教授の程宜しくお願いします。

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