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リン酸化抗体の購入 トピック削除
No.1165-TOPIC - 2009/09/07 (月) 16:38:38 - カル
はじめまして。いつも勉強させていただいております。

私はこの度、EphA2のリン酸化を検出したいと考えています。サンプルは培養細胞です。
そこで検出方法ですが、論文では免沈によるものが多いのですが、どうもCSTからPhospho-EphA2抗体が出たようです。しかし論文はヒットせず、またトランスフェクトレベルのものしか検出できないと書いてあります。
また、もうひとつ、CELL APPLICATIONという会社からも出ています。こちらは内在性レベルのものを検出できると書いてありますが、同様に掲載論文がありません。

こういった場合どういう手段で皆様は取り組まれるでしょうか?
またCELL APPLICATIONの抗体を用いた事のある方はいらっしゃいますか?

わかりにくい文章で申し訳ありませんが、よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.1165-3 - 2009/09/09 (水) 12:04:55 - カル
通りすがりさんありがとうございます。

> 内在性レベルの抗原が認識できないという結果があるかどうか、
> (代理店経由で)メーカーに尋ねることは可能だと思います。

早速問い合わせてみました。やはりリガンドで活性化させても内在性のものは検出しにくいようです。

よってCell Application社の抗体を検討してみたいと思います。
ありがとうございました。

抗体メーカーの件、私も知りたいところです。。。

(無題) 削除/引用
No.1165-2 - 2009/09/08 (火) 13:56:45 - 通りすがり
リン酸化抗体を用いたウェスタンを大量に行うラボに居ますが、
ラボ内の基準としては、ウェスタンの写真があれば掲載論文と
同等の信用性があると考えているようです。

個人的な印象としては、CST社のリン酸化抗体は基本的にどれも
写真がついていますし、ラボ内の使用実績からもかなり信用
できると思っています。
ただ、transfectレベルの抗原しか認識できないというのは
ちょっと引っかかりますね・・・
内在性レベルの抗原が認識できないという結果があるかどうか、
(代理店経由で)メーカーに尋ねることは可能だと思います。

Cell Application社の抗体を使った経験はありませんが、
ウェスタンの写真が載っているようですので、一応信用しても
よいかなぁと思いました。
CST社の返答次第ではこちらを第一選択にせざるを得ないと思います。
(IPすれば済むのなら、それが一番近道だとは思いますが・・・)

# 余談ですが、biocompareに引っかからない抗体メーカーって
# 結構たくさんあるようですね・・・
# どなたかよい抗体検索サイトをご存知でしたら教えてください。。。

リン酸化抗体の購入 削除/引用
No.1165-1 - 2009/09/07 (月) 16:38:38 - カル
はじめまして。いつも勉強させていただいております。

私はこの度、EphA2のリン酸化を検出したいと考えています。サンプルは培養細胞です。
そこで検出方法ですが、論文では免沈によるものが多いのですが、どうもCSTからPhospho-EphA2抗体が出たようです。しかし論文はヒットせず、またトランスフェクトレベルのものしか検出できないと書いてあります。
また、もうひとつ、CELL APPLICATIONという会社からも出ています。こちらは内在性レベルのものを検出できると書いてありますが、同様に掲載論文がありません。

こういった場合どういう手段で皆様は取り組まれるでしょうか?
またCELL APPLICATIONの抗体を用いた事のある方はいらっしゃいますか?

わかりにくい文章で申し訳ありませんが、よろしくお願いします。

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