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(無題) 削除/引用 No.112-3 - 2009/03/01 (日) 00:52:40 - RT-PCR初心者です． >ヤッターワン様 早速にありがとうございます． プライマーのデザインとはいい情報を教えて頂きました． 早速デザインしてみます．

(無題) 削除/引用 No.112-2 - 2009/02/28 (土) 05:18:43 - ヤッターワン 半定量ＰＣＲですか？ そうでないなら、one-step でいいと思います。 半定量だとしても、イントロンをはさむ形で primer を設計すれば、reviewer に突っ込まれても反論できます。 one-step のいいところは、直接 target の primer でリバトラかけるので、増えやすいところです。 ただ、fiderity はあまり高くないです。

on step RT-PCRについて 削除/引用 No.112-1 - 2009/02/28 (土) 04:03:18 - RT-PCR初心者です． いつも大変に勉強させて頂いております． 今度，細胞からのRT-PCRを初めて行うことになったのですが，ラボにはQIAGENのone step RT-PCR kitがありました． 教科書では，PCRのコントロールにRNAをテンプレートにしてネガコンにしないと，論文の査読では必ず聞かれるともあります．この点からは，RTを行ってcDNAを作成してから，PCRを行ったほうがいいのではと考えました． 最近では，細胞に試薬をかけるだけでRNAの抽出もいらないPCRのkitもありました． 論文に投稿を目標とするなら，このようなkitは使わない方がいいのでしょうか？それとも確率された方法論であるのかお教え頂ければ幸いです．

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