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ChIP トピック削除
No.1106-TOPIC - 2009/08/26 (水) 10:56:55 - kanekane
はじめまして。
今回、初めて投稿させていただきます。

転写因子の機能解析を行っており、ある標的遺伝子の転写活性を亢進させることをレポーターアッセイにて確認を行いました。
次に、ChIPを行う予定なのですが、この転写因子の抗体がありません。そこでN末端にmyc-tagをつけたベクターを作成しました。

そこで、質問ですが、ChIP用に使えるmyc-tag抗体をご存知でしょうか。
また、myc以外のFlag, HisやHAなどのtagについても同様にChIPに使える抗体がありましたら教えていただけないでしょうか。

どうぞよろしくお願いいたします。
 
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(無題) 削除/引用
No.1106-4 - 2009/08/27 (木) 01:22:33 - あべちゃん
>[Re:3] kanekaneさんは書きました :

> 現在、tag付きベクターをいくつか作成しているのですが、mycが一番効率が良かったのでまずはmyc抗体を探す目的で投稿しました。

ちょっと気になっただけですので、myc抗体が駄目というつもりではありません。IPの効率が良かったのなら、その時使用された抗体を用いれば良いのではないかと、思うのですが、どうでしょう?

> その他のflagやHA、HisなどのChIPもしくはIP用の抗体もあればいいのですが、ご存知でしたら教えてください。
> お願いします。

私はBabCoのmouse monoclonal HA 抗体を使っています。IPにもよく使われていますし気に入っています。ちなみに、invivogenで販売されているmouse monoclonal HA 抗体はBabCoのOEMで同等品に当たり、価格も安いです。


IPの効率で言えば、例えば、HAなどのエピトープを複数回繰り返すことで、顕著に効率が良くなりますよ。

ChIP用抗体 削除/引用
No.1106-3 - 2009/08/26 (水) 11:59:50 - kanekane
お返事ありがとうございます。
内因性のものもありますし確かにそうですね。
アブカム社のmyc抗体はChIPにも使用できるとありました。そのreferenceとしてEMBOやJBCに掲載されていました。

現在、tag付きベクターをいくつか作成しているのですが、mycが一番効率が良かったのでまずはmyc抗体を探す目的で投稿しました。
その他のflagやHA、HisなどのChIPもしくはIP用の抗体もあればいいのですが、ご存知でしたら教えてください。
お願いします。

(無題) 削除/引用
No.1106-2 - 2009/08/26 (水) 11:22:27 - あべちゃん
主にヒトとマウスの細胞を扱う私としては、ChIPの時の用いる抗体として
myc抗体は避けるのですが、大丈夫なんでしょうか?

一般的な意見を聞いてみたいところです。

ChIP 削除/引用
No.1106-1 - 2009/08/26 (水) 10:56:55 - kanekane
はじめまして。
今回、初めて投稿させていただきます。

転写因子の機能解析を行っており、ある標的遺伝子の転写活性を亢進させることをレポーターアッセイにて確認を行いました。
次に、ChIPを行う予定なのですが、この転写因子の抗体がありません。そこでN末端にmyc-tagをつけたベクターを作成しました。

そこで、質問ですが、ChIP用に使えるmyc-tag抗体をご存知でしょうか。
また、myc以外のFlag, HisやHAなどのtagについても同様にChIPに使える抗体がありましたら教えていただけないでしょうか。

どうぞよろしくお願いいたします。

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