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ありがとうございます 削除/引用 No.1103-5 - 2009/08/30 (日) 00:11:49 - 初心者 皆様ありがとうございます。 膜から抽出にこだわるのは、量が少なく精製が難しそうなタンパクのためです。 確かにゲルの方が扱いやすいですし、精製を検討し、SDS-PAGEでの分離、抽出試してみます。

(無題) 削除/引用 No.1103-4 - 2009/08/26 (水) 23:42:50 - おお >[Re:3] Cさんは書きました : > 昔からいろんな方法が報告されていますが、かなり難しいです。 確かにマスに持っていくには膜からと言うのはありますが、 プレパラティブとなるとやめた方がいいでしょうね。 そういえばペプチドシーケンスなども膜から抽出というのが ありますが、、、、

(無題) 削除/引用 No.1103-3 - 2009/08/26 (水) 23:29:26 - C 昔からいろんな方法が報告されていますが、かなり難しいです。事実、リプロービングとかでかなり厳しい条件で膜洗ってもブロットした蛋白質はとれないことでもわかるように、かなり強固です。実際やってみると、実感としてわかると思います。ゲルから抽出する方がまだ見込みあります。もちろんこれはこれで回収率低いけど、膜からよりはまだいいかなと言う感じですが。

(無題) 削除/引用 No.1103-2 - 2009/08/26 (水) 03:04:48 - おお ttp://www.sciencedirect.com/science?_ob=ArticleURL&_udi=B6W9V-4CCNSVF-1&_user=1458830&_rdoc=1&_fmt=&_orig=search&_sort=d&_docanchor=&view=c&_searchStrId=990564080&_rerunOrigin=google&_acct=C000052790&_version=1&_urlVersion=0&_userid=1458830&md5=b7d7ba29b02dad4945652d51b0d2c5ae Elution from polyvinyldifluoride membranes was most efficient using either concentrated solutions of trifluoroacetic acid (TFA) or combinations of 8 M urea and 1% Triton X-100, 1% Tween 20, or 40% isopropanol.

PVDF膜からタンパク抽出 削除/引用 No.1103-1 - 2009/08/25 (火) 23:37:59 - 初心者 はじめまして タンパク実験の初心者です。 組織のホモジネートをSDS-PAGE、WBを行い薬剤投与によるある酵素への影響を見ています。 現在、WBにて確認したバンドからタンパクを抽出したいと思っております。 SDS-PAGEではゲルを切り取りbuffer中で自然拡散によって目的のタンパクを抽出できるとタンパク質実験ノートでみましたが、PVDFメンブレンでも同じように抽出できるのでしょうか？ ご存知の方ご教授いただけますようよろしくお願いします。

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