全6件 ( 1 〜 6 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.1099-6 - 2009/08/26 (水) 23:39:35 - おお >[Re:5] フェニックスさんは書きました : > おお様、ありがとうございます。 > > １例でも例外があれば、一般的にMonoQにHisタグ蛋白が向かないという説は否定されますね。 １例だけなので例外かも、、、、 ただ、経験則というのは役に立つし、参考にしても良いとは思いますが、 経験則の可也が別に科学的ではなかったり、科学的検証をしてなかったり します。 どう判断するか、どう生かすかはやはり研究者の技量になってくるんでしょうね。 科学的に根拠がないから無視するか、それとも無くても重要と考えるか、、、、 HISはアロマティックリングを持ってますのでpH次第では疎水性に可也偏り ますね。酸性領域のほうがカラムにつきにくいかもしれません。

(無題) 削除/引用 No.1099-5 - 2009/08/26 (水) 21:10:34 - フェニックス おお様、ありがとうございます。 １例でも例外があれば、一般的にMonoQにHisタグ蛋白が向かないという説は否定されますね。

(無題) 削除/引用 No.1099-4 - 2009/08/26 (水) 10:03:20 - おお HISタグのついたリコンビナントをQで精製したことがあります。 いろんな種類やったということではありませんが、、、、 あとQやSなど強いイオン交換は高い塩濃度で溶出しなければ ならなくなります。高い塩濃度ほど疎水相互作用は強くなりますので 疎水性の強いタンパクは溶出されるはずの塩濃度で 支持体と疎水相互作用で吸着してしまうというシナリオも あります。 総合的に考えて、確かにゲル濾過のほうがいいのかもしれません。 構造をやっているラボの精製のストラテジーでアフィニティーのあと ゲル濾過を持ってくるところも結構あると聞きます。

(無題) 削除/引用 No.1099-3 - 2009/08/26 (水) 08:57:03 - フェニックス おお様、ありがとうございます。これは実際にご経験があってのことでしょうか？それとも、思考上のことでしょうか？ 私は実際に経験がある人から聞いたのですが、その人はおそらく、３−４種違ったHisタグ蛋白の実際の経験をもって言っていたとおもいます。

(無題) 削除/引用 No.1099-2 - 2009/08/25 (火) 08:57:24 - おお >[Re:1] フェニックスさんは書きました : > Hisタグ蛋白をさらに精製するとき、MonoQなどのメジャーなイオン交換樹脂による精製法は、カラムに吸着して出てこない？？ため向かないと聞いたことがあります。これは本当でしょうか？ そう言う事ではないと思います。 扱っているタンパクしだいだとおもいます。それとバッファーの 選択もあると思います。確かに支持体に吸着しやすいたんぱく質が、 イオン相互作用で吸着したあと、支持体にトラップされてしまったり ということを考えれば(HISとは関係なしに)イオン交換は吸着する可能性が ゲル濾過とかより高いかもしれません。

Hisタグ蛋白とMonoQなど 削除/引用 No.1099-1 - 2009/08/25 (火) 08:26:32 - フェニックス Hisタグ蛋白をさらに精製するとき、MonoQなどのメジャーなイオン交換樹脂による精製法は、カラムに吸着して出てこない？？ため向かないと聞いたことがあります。これは本当でしょうか？

全6件 ( 1 〜 6 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

---