全6件 ( 1 〜 6 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.105-6 - 2009/05/14 (木) 00:19:34 - 通りがかり invitrogenのRNAiMAX、QIAGENのHiPerFectでの経験ですが、 そこそこ入っています。 今はほとんどRNAiMAXで、ものによって70%-90% KDくらい。 （siRNA 10nMです） 添付マニュアル通りの手順で、 HUVECを6-wellに15万/wellくらいでまいて、 翌日transfectionしてます。 コンフルエントに近い状態でやった方が 毒性が出ない気がしています。

(無題) 削除/引用 No.105-5 - 2009/05/11 (月) 06:10:20 - 通行人 まだ２種類の細胞株しか試してませんが、invitrogenのRNAiMAXも、あまり・・・。 electroporation はいいと思います（しかし、running cost がかかる）。 私は plasmid タイプにして、G416 で選択しようかと考えています。

御礼 削除/引用 No.105-4 - 2009/05/08 (金) 10:01:59 - Momo あぽくんさん、 ありがとうございます。 結局、ambionを使いましたが、効率が悪く(70% remaining)、行き詰まっています。 invitrogenのtransfection reagentに変えても同様でしょうか。あるいは、エレクトロポレーションをすることも考えています。

トランスフェクション効率が悪かった 削除/引用 No.105-3 - 2009/02/27 (金) 14:24:09 - あぽくん HUVECはトランスフェクション効率が悪かったです。 なので、invitrogen社のレンチウイルスを用いました。 これは、shRNAiを発現させて、KDするシステムです。 レンチを使うと簡単にKDできました。 他のウイルスでは試していませんが、ウイルスを使った方が楽だと思います。 ただし、システムの導入には初期投資が必要という問題もあります。。。

トランスフェクション効率が悪かった 削除/引用 No.105-2 - 2009/02/27 (金) 14:20:05 - あぽくん

siRNA for HUVEC 削除/引用 No.105-1 - 2009/02/27 (金) 00:22:06 - Momo HUVECでRNAiを検討しています。 合成siRNAやトランスフェクション試薬のお勧めのメーカーについて、ご経験のある方がいましたら教えて下さい。 RNAiは初めてなので、詳しく教えていただけると助かります。

全6件 ( 1 〜 6 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

---