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(無題) 削除/引用 No.9999-5 - 2021/10/26 (火) 20:43:20 - KGSM 共焦点でまずは調べます。大抵はそれだけで十分かと。

(無題) 削除/引用 No.9999-4 - 2021/10/26 (火) 17:47:35 - TS とりあえず細胞膜分離と共焦点？ 膜タンパク質のビオチンラベルとかもデータをサポートするかも。

(無題) 削除/引用 No.9999-3 - 2021/10/26 (火) 17:32:06 - 774 これは膜局在を確認する手法を一般論として問われたんですか? ○○が具体的な何かであるなら、最初にその局在を確認したという論文を当たれば良いように思うけども。 または手法の確立に至る経緯を聞いているんじゃないんですかね?

(無題) 削除/引用 No.9999-2 - 2021/10/26 (火) 17:09:24 - Egeria 「膜に局在している」ということを示すのなら、細胞破砕液を遠心して沈殿＝膜画分に回収されるかどうかを見るのが普通だと思います（生化学的手法だけに限定すれば）。どの膜に局在しているかによって遠心条件が変わります。 carbonate extractionは、膜に局在していることがわかっているタンパク質について、膜表在性（静電的相互作用によって膜に結合している）なのか膜内在性（疎水性相互作用によって膜に埋め込まれている）なのかを明らかにするための方法です。高いpHで静電的相互作用を狂わせることで膜表在性タンパク質を膜から剥がします。 同じような目的で用いられる手法としてはTriton X-114を用いた二相分配法もあります。こちらは疎水性タンパク質だけを界面活性剤層に分離して回収します。どちらもかなり古典的な手法です。

膜局在解析の進め方 削除/引用 No.9999-1 - 2021/10/26 (火) 15:40:42 - あき 表題に関してなのですが、ある論文を読んでいるときに「炭酸ナトリウム抽出法を使って○○タンパク質の膜局在を明らかにした」という記述がありました。 あるタンパク質が膜局在していることを調べる方法として、炭酸ナトリウム抽出法というのを使うのがスタンダードなのでしょうか？ 先日教員に、「○○というタンパク質が膜局在しているという一般的に言われているが、どのような手順でそれがわかったのかを説明して」と言われて答えられず、調べている最中でして。 膜局在を調べる流れを知っている方がおられたらご教示願います。

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