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(無題) 削除/引用 No.9962-3 - 2021/10/11 (月) 18:59:54 - TP HBSSはPBSベースにグルコースと炭酸水素ナトリウムを加えたもので、細胞の生存維持に少しは役立つかもしれません。そのため、細胞をソートして培養する場合には（気休めだとしても）一つの選択肢になるでしょう。 一方、染色解析だけの場合、通常は防腐と細胞表面マーカーのinternalizationを防ぐ意味合いもかねてNaN3を入れますので（代謝的固定と表現される）、この場合あえてHBSSを使う理由はありません。 FBS(あるいはnew born calf serum）やBSAのタンパクの添加は、細胞膜の安定化（一つに表面張力の緩和）や細胞のチューブ壁への付着を軽減するの効果がありますが、入れなくても実はそんなに変わらないという話しもありますので(場合によると思われる)、どれくらい入れるのがいいかという基準はありません。まあ0.5％〜2％くらいが相場といったところでしょうか。

(無題) 削除/引用 No.9962-2 - 2021/10/08 (金) 13:09:21 - ema 単純ベストはありません。自分のサンプルにあったものを使うため色々なバッファーがあります。 私は基本はPBS（-）＋2mMEDTA＋0.5％BSA（5％凍結：使う分加える）で作業しますが、0.5％BSAの部分を手持ちのFBS2％　細胞が弱いなどもっとマイルドな条件でしたいときにはFBS5％まで上げます。ブロック能力の強弱、血清中の夾雑物が問題になることもあります。BAS,FBSなどを腐らせないためか市販のはAzideが入っているものがありますが自身は培養に使うなどを考えて入れていません。 PBSはほとんど試薬が塩くらいしかないので、やはり弱い細胞の場合にHBSSでしますがコストは少し高くなるので、問題ない細胞染色の場合はPBSです。 バッファー種類が増えて良いなら、抗体を付けたりする部分はPBS（-）＋2mMEDTA＋0.5％BSA、洗浄はPBS（-）＋2mMEDTA　にしています。

FACS bufferって何がいいんですか？ 削除/引用 No.9962-1 - 2021/10/07 (木) 15:31:15 - FBS タイトル通りですが、FACS bufferはいくつかバリエーションがあるのですが、どの組成がいいのでしょうか？ あるいは使い分けはあるのでしょうか。 最もシンプルな組成は、PBS/FBSですが、HBSSを組み合わせたbufferも存在します。 FBSの濃度も多少幅があります。

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