全5件 ( 1 〜 5 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.9915-5 - 2021/09/16 (木) 21:28:22 - cry 凸様、 大変詳しい経験論を聞かせてくださり、ありがとうございました。 大変参考になりました。 やはり未固定切片ですと、空気中の水分を吸い、組織の分解がすすみそうですね。 もっと驚いたのは-80度に数ヶ月入れたものと、一月入れたものとで違いがでるということです。 質問させていただき、本当によかったと感じています。 ありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.9915-4 - 2021/09/15 (水) 19:20:42 - 凸 観察対象や抗体によりますが、数日放置なら多分染まることは染まると思います。 未固定凍結切片の場合ですが、私自身の経験では染色の良否というか抗体の反応性は、１）薄切して乾燥後その日のうちに免疫染色に供した場合＞＝２）薄切, 乾燥後に-80度に保存した場合（１ヶ月以内）＞３）薄切, 乾燥後に-80度に保存した場合（数ヶ月）＞４）薄切、乾燥後室温または４度で数日放置した場合>>>>５）薄切、乾燥後室温または４度で１ヶ月以上放置した場合（全く染まらなくなることもある）な感じです。 薄切後の切片の乾燥はドライヤー（冷風モード）で5分くらいやってから室温で１〜2時間程度（一晩放置したこともあります。違いは見られませんでした）おいてから-80℃で保存し、遅くとも１ヶ月以内には免疫染色するようにしてます。 長い期間空気にさらされるのが一番良くないみたいです。お菓子に入っているような脱酸素剤入れて密封すれば室温保存でもいいのかもしれません。

(無題) 削除/引用 No.9915-3 - 2021/09/15 (水) 18:17:20 - B6 AA様、ありがとうございます。 in situでは24時間乾燥というのがあるのですね。知りませんでした。 私の同僚には切片作製後、すぐに-20度に移す人もいれば、3時間乾燥後に-80度に移す人もいます。 なのでひょっとしたら固定した組織からの凍結切片は常温で保存されてる方もひょっとしているのでは？とも思いたくなります。私は3時間の乾燥ですが、其れ以外の時間や保存方法をとられてる方がいらっしゃいましたら、ぜひご意見をいただきたいです。よろしくお願いいたします。

(無題) 削除/引用 No.9915-2 - 2021/09/15 (水) 15:18:43 - AA 新鮮凍結切片なんかだとだめになっているかもしれませんが、固定切片なら観察できないということはないんじゃないでしょうか。 もちろん、全く問題は生じない、とはいえませんが、目的にもよるとおもいます。 in situ hybridizationでも切片をガラスに貼り付けたあと室温で24時間乾燥させるプロトコルなどもありますから、単純な組織の形態を見る場合や核酸を見るくらいなら大丈夫かもしれません。 私なら、よほど貴重でない限りは、同じサンプルを作り直して比較してみると思いますが。

凍結切片の常温放置（数日） 削除/引用 No.9915-1 - 2021/09/15 (水) 14:21:34 - cry いつも拝見しております。 凍結切片を作製したのち、風乾を数時間行なったのち、-30度でスライドを使うまで保存しています。 実は先週頭に作製したスライドを、約5日間ほど常温に放置していることに気がつきました。 これは一般的に考えて染めない方が良いサンブルとなりますでしょうか？ 通常の風乾３時間では十分乾燥してるので、それ以上乾燥することがサンプルをダメにしてしまうとは考えにくいのですが、みなさまはどのようにお考えになられますでしょうか？ 稚拙な質問で恥ずかしいですが、よろしくおねがいします。

全5件 ( 1 〜 5 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する 名前  メール  　アドレス非公開    タイトル  本文       設定  クッキーを保存（次回の入力の手間を省けます） 上に上げない（トピックの一覧で一番上に移動させません） 解決（問題が解決した際にチェックしてください） 暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。 送信

---

〔使い方〕 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。

---