全6件 ( 1 〜 6 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.9893-6 - 2021/09/04 (土) 11:19:59 - ゆ L6は馬血清にしたりとか低濃度FCSにすると分化のスイッチはいるよ。もちろん融合して多核の筋線維になるまでには週単位の時間がかかるけど。

(無題) 削除/引用 No.9893-5 - 2021/09/03 (金) 02:01:23 - おお L6など筋芽培養細胞の実験をちょっと見てみたけど、完全にSerum freeで３時間というプロトコールしか見つからなかった。ということは細胞が少し変わってしまっていのかもしれない。どこかそういう実験しているところから細胞を分けてもらうという話もまあまあある。 低濃度血清でやることは手っ取り早いし、他の細胞などではやられていると思える。その場合血清濃度は低ければ低いほうがいいだろう。場合によっては０．１％もあればなんとかなると思う。筋芽培養細胞はFCSにさらに馬血清を数％加えたりするようなので、馬血清で対応してもいいかもしれない。 培地もいくらかやりようがあるとは思うが（BSA、フェリチン、セレンなど添加するとかDMEM/F12を使うとか）、それをごちゃごちゃやってどううまくいくかあまり検討がつかない。

(無題) 削除/引用 No.9893-4 - 2021/09/02 (木) 13:02:56 - gy8eis stavationていうか血清に含まれるインシュリンの影響を排除するために無血清にして実験するのではないかと思っていました。なので無血清で数時間培養してinsulin receptor下流のシグナルが定常状態に落ち着けばそれで良いのでは。ホルモンの実験するときは血清の問題を考慮した方法がとられます。

(無題) 削除/引用 No.9893-3 - 2021/09/02 (木) 11:32:27 - UU 細胞とか見たいものによると思いますが，別の細胞では3時間くらいでもインスリン受容体とかEGFRのリン酸化は減弱していました． 他の方がいうように，無血清培地が厳しければ低濃度FBSなどで検討するのがよいと思います． 実験目的に依存するので，最初に飢餓時間の条件検討からするのがスタンダードではないでしょうか．

(無題) 削除/引用 No.9893-2 - 2021/09/02 (木) 00:29:29 - milo では２時間のstarvationでは、その目的のシグナルは通常培養時よりも下がった状態なのでしょうか？それだったら目的にかなうのではないでしょうか。 starvationはどういう状態ですか？例えば通常10％のFBSを0％にしてインキュベーションしている状態をstarvation状態というのであれば、これで3時間で弱るのでしたら、1％とか低いFBSの濃度にしてしばらく置くとか。その目的のシグナルが低い状態にもっていければインスリン刺激でどう変化するかわかりませんかね。そういう実験目的なのかはわかりませんけども。

starvationの時間 削除/引用 No.9893-1 - 2021/09/01 (水) 12:31:55 - まっちゃ 筋芽培養細胞にてインスリン刺激によるシグナル伝達を検出するのに、培養した細胞をstarvationにかけるのですが、3時間以上かけると弱って丸くなってしまいます。 starvationは時間が短くても効果が出るものなのでしょうか。 詳しい方がいらっしゃいましたらご教示いただけると幸いです。

全6件 ( 1 〜 6 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する 名前  メール  　アドレス非公開    タイトル  本文       設定  クッキーを保存（次回の入力の手間を省けます） 上に上げない（トピックの一覧で一番上に移動させません） 解決（問題が解決した際にチェックしてください） 暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。 送信

---

〔使い方〕 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。

---