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培地に浮かぶ白い玉のようなカビ トピック削除
No.9883-TOPIC - 2021/08/26 (木) 20:02:13 - カビ
細胞を培養してたらインキュベーターの水のトレー内に白い玉のようなカビが生えることがあります。

見かけたらすぐに処理するようにしていますが、その玉が培養ウェル内に生えました。生えたウェルは処分しまして、インキュベーター内はエタノールで拭きましたが、他のコンタミのないウェルも心配です。

あのカビって一つでも胞子があったら増えてきますか?また生えたウェルがあったら他のウェルももう絶望的でしょうか?
 
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No.9883-4 - 2021/08/27 (金) 10:49:09 - 774
インキュベーターの棚板とかファンとか、外せるだけ外して洗った方が良いですよ。
ファンは割とひどいことになっているのを見ます。
クリーンルームでない通常の部屋においているインキュベーターは約半年に1回、下記の工程で洗浄しています。
中性洗剤で洗う→エタノールで拭く→乾熱滅菌可能なら乾熱滅菌、無理ならクリーンベンチでUV照射

(無題) 削除/引用
No.9883-3 - 2021/08/27 (金) 01:49:57 - おお
胞子とか培地に入ればまず増えてくると思ってください。どうしてもというときは、プレートの残りのWellでその実験を終わらすということはありなのかもしれませんが、ほかがコンタミしない保証はありませんし、そのプレートで増えたということはインキュベーター内にいてもおかしくはありません。

また、そのインキュベーターはあなたしか使ってないのですか?そこも考える必要がありませんか?

(無題) 削除/引用
No.9883-2 - 2021/08/27 (金) 01:14:53 - K

隣接するwellも培地交換時などの際に微細な飛沫が飛んだり、胞子が飛んだりして汚染してる可能性はあるかもしれませんが、経験では周りのwellはなんでもなかったこともあります。カビは増殖が遅く目視で気づくまで少し時間かかります。

どうしてもレスキューしたければ細胞を数回PBSで洗ってから抗真菌剤アンホテリシンBを含む新しい培地で培養してみてください。それで培地交換(これもアンホテリシンB入り)を2日に1回くらいしてそれで7~10日培養してみてください。途中でコンフレントになったら継代していいです、
細菌と違いカビは(特に37℃では)増殖が遅いので、駆除できる可能性はあります。

カビ汚染が心配な培養室環境(またそうでなくても)では大事な細胞はフィルター付きフラスコを使うようにしています。細菌用抗生剤+抗真菌剤の培養用抗生剤混合液も売ってるので検討ください。

培地に浮かぶ白い玉のようなカビ 削除/引用
No.9883-1 - 2021/08/26 (木) 20:02:13 - カビ
細胞を培養してたらインキュベーターの水のトレー内に白い玉のようなカビが生えることがあります。

見かけたらすぐに処理するようにしていますが、その玉が培養ウェル内に生えました。生えたウェルは処分しまして、インキュベーター内はエタノールで拭きましたが、他のコンタミのないウェルも心配です。

あのカビって一つでも胞子があったら増えてきますか?また生えたウェルがあったら他のウェルももう絶望的でしょうか?

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