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マウス組織内に存在するヒト由来の細胞の染色 トピック削除
No.9863-TOPIC - 2021/08/19 (木) 11:17:54 - 染色
マウスの組織内にあるヒト由来の細胞を特異的に染色したいのですが、時間がかからない一番はやい染色方法はなんですか?
Anti-Human Nucleiとかで免染すればいいんですが、オーバーナイトか少なくとも1時間以上の染色時間が必要かと思います。
できれば1時間以内で、パッとかければヒト細胞特異的に染まるような試薬があれば、是非教えてください。
 
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(無題) 削除/引用
No.9863-7 - 2021/08/20 (金) 14:29:33 - おお
>ラベルつきの一次抗体だとFACS用のとか

いや、FACSように特化してなくてもいいですよ。私が示したものを含めて免疫染色で染まる抗体で、その抗体にラベルが入ったものが売っているか確かめたらいいです。ラベルは自分でつけてもいいし。免疫染色でもラベルのついた一次抗体を使うことは結構ありますよ。

ご回答ありがとうございます。 削除/引用
No.9863-6 - 2021/08/20 (金) 12:30:58 - 染色
ii さん
移植細胞の機能を見る実験ですので、蛍光タンパク質が影響するという可能性を極力排除したいので、ラベルはしにくいかと思います。

おお さん
ラベルつきの一次抗体だとFACS用のとかのを使うってことですよね、それも検討してみます。もっと手軽な抗体以外の試薬があればと思ったのですが、ありがとうございます。

(無題) 削除/引用
No.9863-5 - 2021/08/20 (金) 00:54:42 - おお
>[Re:3] 染色さんは書きました :
> おお さん
> ご回答ありがとうございます。
>
> 抗体だと免染になってしまうので、確実に1時間以上必要かとおもいます。
> できれば1時間以内で結果が見れる試薬を所望しております。

一次抗体に直接ラベルを入れとけば単純に染色作業は半分になりますがそれでもだめですか?よく染まる抗体だと30分も染色すれば観察できると思いますけどね。

(無題) 削除/引用
No.9863-4 - 2021/08/19 (木) 23:35:55 - ii
免染でダメなんならもうヒト細胞の方をあらかじめ蛍光タンパク質か何かでラベルしておくしかないのでは。

回答ありがとうございます。 削除/引用
No.9863-3 - 2021/08/19 (木) 19:28:44 - 染色
おお さん
ご回答ありがとうございます。

抗体だと免染になってしまうので、確実に1時間以上必要かとおもいます。
できれば1時間以内で結果が見れる試薬を所望しております。

(無題) 削除/引用
No.9863-2 - 2021/08/19 (木) 16:54:12 - おお
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4161450/
抗体なら色々あると思うけど、

https://www.ptglab.com/products/SMN2-Antibody-60154-1-Ig.htm
これなんかスプライシングに必要な因子だしある意味ハウスキーピングといってもいいのかもしれない。
同じ会社でたしかMAVとかいう蛋白のモノクロもヒト特異的だったと思う。

マウス組織内に存在するヒト由来の細胞の染色 削除/引用
No.9863-1 - 2021/08/19 (木) 11:17:54 - 染色
マウスの組織内にあるヒト由来の細胞を特異的に染色したいのですが、時間がかからない一番はやい染色方法はなんですか?
Anti-Human Nucleiとかで免染すればいいんですが、オーバーナイトか少なくとも1時間以上の染色時間が必要かと思います。
できれば1時間以内で、パッとかければヒト細胞特異的に染まるような試薬があれば、是非教えてください。

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