Bio Technical フォーラム

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RNA-seq用のサンプル調整 トピック削除
No.9855-TOPIC - 2021/08/13 (金) 15:10:06 - かくさん
外注にてRNA-seqを依頼しようかと考えています。

手持ちの抽出キットがないためTRIzolにて抽出したRNAをDnase処理して提出しようと考えているのですが、一般的にDnase処理後に再精製したほうが良いのでしょうか。

あるいは、そのままで良いものなのでしょうか。

反応を止めるEDTAやDTTなどが含まれていても問題にならないのでしょうか。
　
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(無題) 削除/引用
No.9855-2 - 2021/08/13 (金) 16:29:10 - あかね
必ず再精製、
いくら高温で失活できるDNaseでも、下流でRT, アダプターライゲーションなどDNA絡みの反応が待っているので、絶対取り除く。

RNA-seq用のサンプル調整 削除/引用
No.9855-1 - 2021/08/13 (金) 15:10:06 - かくさん
外注にてRNA-seqを依頼しようかと考えています。

手持ちの抽出キットがないためTRIzolにて抽出したRNAをDnase処理して提出しようと考えているのですが、一般的にDnase処理後に再精製したほうが良いのでしょうか。

あるいは、そのままで良いものなのでしょうか。

反応を止めるEDTAやDTTなどが含まれていても問題にならないのでしょうか。
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