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(無題) 削除/引用 No.985-9 - 2012/11/19 (月) 01:09:04 - おお SDSPAGEでクーマシーなどで染めたもののシグナルからでも、既知の濃度のタンパク(BSAなど)の比較で計算できますよね。

(無題) 削除/引用 No.985-8 - 2012/11/18 (日) 22:05:37 - qうぇrちゅいおp＠ とりあえず1163に書いた。

(無題) 削除/引用 No.985-7 - 2012/11/18 (日) 21:38:20 - Harmonia 大体わかればいいのなら、濃度既知の抗体と自分の精製IgGで希釈系列を作り、 ドットブロットを二次抗体検出してはどう？

(無題) 削除/引用 No.985-6 - 2012/11/17 (土) 12:17:54 - たかし teteさん 　精製したIgGがBradfordで見れないという問題は解決しましたか？ 　自分も同じ問題で悩んでいます。もし解決していたら教えてください。

(無題) 削除/引用 No.985-5 - 2012/10/02 (火) 09:26:33 - ~ バッファーの組成が、たんぱく質濃度測定系の上限ぎりぎりでは？ サンプルを希釈してから測定してみてはいかがでしょうか。

(無題) 削除/引用 No.985-4 - 2012/10/02 (火) 01:07:53 - あかね お近くにNanoDropがあるなら、IgG用の濃度計算もできるはず。

(無題) 削除/引用 No.985-3 - 2012/10/02 (火) 00:33:23 - おお どんなバッファーに溶けているかによりますが、280nmで直接測る手もありますよ。定量用試薬必要ないですし。清潔なキュベットなら溶液をいれて測定したあと回収してつかえます。ご自分で確認してから計算してほしいですがBSAで1mg/mlでA280が1だったとおもいます。

(無題) 削除/引用 No.985-2 - 2012/10/01 (月) 22:24:56 - おお 薄すぎたのでは?

精製したＩｇＧの濃度がないです 削除/引用 No.985-1 - 2012/10/01 (月) 20:14:03 - ｔｅｔｅ ハイブリドーマの培養上清からマウスモノクローナル抗体　IgGを、 HiTrap　ProteinGのカラムを使って精製しました。 サンプルを硫安沈殿して脱塩化後、Hitrap　ProteinGのカラムに流し 分画をとりました。中和バッファーもきちんと加えました。 SDSPAGEで流したらちゃんと一部の分画に50kDaと25kDaのみバンドがありました。 でもBioRADのBradford法でタンパク定量したらまったく濃度がない状態です。 バンドには出ているのに濃度がなぜないのか どなたか教えていただけないでしょうか。

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