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RNA抽出のための精巣保存方法 トピック削除
No.9832-TOPIC - 2021/08/03 (火) 20:13:32 - mm
研究初心者です。

ラットの精巣からRNAの抽出を検討しています。

解剖時の処理として、
@液体窒素で凍結して-80℃保存→後日液体窒素中で粉末化
ARNAlaterに入れて保存
の2通りを考えています。

できればAでいきたいのですが、精巣は軟らかいため5mm幅に切りにくく、形態が崩れて中身が出てきてしまうことを懸念しています。
(マウスだと半分に切る程度であまり支障はないかと思います)

精巣はどのように処理するのが良いのか、知見のある方ご教授いただけると幸いです。
 
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(無題) 削除/引用
No.9832-4 - 2021/08/04 (水) 17:22:34 - おお
大抵のRNAようLysis BufferはRNaseを失活するために非常に強い変性剤が入っています(大抵がグアニジンなど、場合によってはフェノールも)。なのでLysis後−80度で保存して必要なときに精製するのはよくやられます。

ねんのため、あなたがお使いのキット、試薬の説明書を確認してください。

(無題) 削除/引用
No.9832-3 - 2021/08/04 (水) 16:33:05 - mmmm
おお 様

投稿ありがとうございます。

解剖後すぐにRNAの発現解析に取りかかるわけではないため保存しておきたいのですが、ホモジネートの状態で保存できるのでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.9832-2 - 2021/08/04 (水) 02:01:21 - おお
即座にRNA抽出用Lysis bufferをいれホモゲナイズするのは無理ですか?

RNA抽出のための精巣保存方法 削除/引用
No.9832-1 - 2021/08/03 (火) 20:13:32 - mm
研究初心者です。

ラットの精巣からRNAの抽出を検討しています。

解剖時の処理として、
@液体窒素で凍結して-80℃保存→後日液体窒素中で粉末化
ARNAlaterに入れて保存
の2通りを考えています。

できればAでいきたいのですが、精巣は軟らかいため5mm幅に切りにくく、形態が崩れて中身が出てきてしまうことを懸念しています。
(マウスだと半分に切る程度であまり支障はないかと思います)

精巣はどのように処理するのが良いのか、知見のある方ご教授いただけると幸いです。

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