Bio Technical フォーラム

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Fluorescent Mounting Media トピック削除
No.9825-TOPIC - 2021/07/30 (金) 02:38:23 - おお
IFなどで使われるFluorescent (Anti-fade) Mounting Mediaですが皆さんはどの商品をお使いですか。

経験論などでどれがいいとか蛍光プローブとの相性とか教えてもらえると嬉しいです。値段もピンきりですし、、、選択基準がイマイチわからないので、、、
 
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No.9825-8 - 2021/07/31 (土) 15:58:21 - toto
珍しいところで、シーリングには普通のマニキュアでなくて、Biotiumの
CoverGrip™ カバーガラス シーリング剤
というのをたまに使います。売りはGFPの蛍光を減弱させないということです。マニキュアでシールするするとその成分でGFPの傾向が弱まるそうです。ほんとかどうか比較したことないですが、オレンジの香りがすることもあり、マニキュアでなくこちらを使ってます。たぶん有機溶剤としてレモゾールを使ってると思います。

マウントは単に97% thiodiethanol/Hepes-Naを使ってます。超安価です。bleachingを防ぐ試薬は使ってません。以前は、DABCOとか使ってましたが、今の色素はまず要らないです。

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No.9825-7 - 2021/07/31 (土) 14:25:47 - vbふ
ずっと低蛍光グリセリンとPBS混ぜて自作してたけど、市販品と比べても何か明らかに劣るような点は感じなかったです。蛍光強度がすごい弱い時は違い見えるのかもしれないけど、そもそもそれは抗体に問題があることが多いように思うので、封入剤変えたところで本質的な解決にはならないように思っていました。

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No.9825-6 - 2021/07/31 (土) 00:17:14 - リンリン
いつもInvitrogenのProLong Goldを使っていました。使っていて特に問題はなかったのでVECTASHIELDは知りませんでした。最近はマウントメディアは使っていませんでしたが、今はThermoFisherさんもProLong Glass、ProLong Diamondとさらに進化させたものを出しているようですね。VECTASHIELDとの比較も一応されているようです。

ttps://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/cell-analysis/cellular-imaging/fluorescence-microscopy-and-immunofluorescence-if/mounting-medium-antifades/prolong-gold-antifade.html?SID=fr-antifade-1

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No.9825-5 - 2021/07/30 (金) 23:48:34 - おお
みなさん揃ってVECTASHIELD Mounting Mediumなのですね。そういう意味では信頼性がある商品のようです。コメントありがとうございました。

>[Re:4] あのさんは書きました :

> 案外、綺麗に見えるのは、グリセリンとマニキュアです。

グリセリンだけでも退色がそんなにないのですか。それならちょっと豆知識みたいなのが増えました。むかしの自作のプロトコールはおぼろげに覚えているのは95%グリセロールになにかケミカルを溶かしたもだったのを思い出しました。

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No.9825-4 - 2021/07/30 (金) 19:37:16 - あの
以下、全て、共焦点での話です。

VECTASHIELD Mounting Mediumを使ってます。
Dapi 入りだったり、無かったり。

案外、綺麗に見えるのは、グリセリンとマニキュアです。
ただしグリセリン層が分厚いと、低倍率レンズで見た時に
周辺光量が少なく暗くなります。屈折のためと思ってます。
その場合には、カバースリップを
割れないように押して、グリセリン層を薄くします。

まあ、VECTASHIELD Mounting Mediumでいいんじゃない。

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No.9825-3 - 2021/07/30 (金) 12:14:29 - wwn
こちらもVECTASHIELD を基本で使用していますが一部の蛍光色素と相性が悪いです。
具体的にはAlexa546, 647では退色が早まります。
このような場合はSlowFade Diamond Antifade Mountantを使用しています。
*SlowFadeのウェブサイトにも一部情報がありますが、少し経験と違う印象ではあります。

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No.9825-2 - 2021/07/30 (金) 11:41:17 - ●_●
VECTASHIELD Mounting Medium with DAPI
比較はありませんが特に困っていません。DAPI入りで核染色は不要。

Fluorescent Mounting Media 削除/引用
No.9825-1 - 2021/07/30 (金) 02:38:23 - おお
IFなどで使われるFluorescent (Anti-fade) Mounting Mediaですが皆さんはどの商品をお使いですか。

経験論などでどれがいいとか蛍光プローブとの相性とか教えてもらえると嬉しいです。値段もピンきりですし、、、選択基準がイマイチわからないので、、、

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