Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

T細胞培養の抗体、CD3だけでは不十分? トピック削除
No.9816-TOPIC - 2021/07/22 (木) 04:52:29 - TT
現在ヒトPBMCからT細胞をセレクションしましてこのT細胞を活性化、及び培養したいと思っております。ダイナビーズは使わずに抗体を刺激として入れようと思っているのですが、CD3だけでは不十分でしょうか?CD3とCD28の両方必要でしょうか?IL-2は入れます。CD3とIL-2で培養しているのですがどうも増えているような気がせず、ThermoFisherを見るとCD28も入れているようですが。。。ご経験のある方、コメントをしていただければ幸いです。よろしくおねがいします。
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



5件 ( 1 〜 5 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.9816-6 - 2021/07/23 (金) 00:27:57 - TT
コメントありがとうございます。大変参考になります。

CD3だけでもだけでも刺激は入るが弱い、というのが同じような印象です。コートはせずに培地に抗体を入れているだけです。実験群とポジコンは別にあって、「ちなみに一般的な刺激であるCD3を入れた場合とも比較してみよう」と補助的につけた群なのでそこまで深く検討はしていませんでした。論文は全文が読めないのですが、要旨をみますとCD3単独と両方入っているものでは増殖に違いがあると。ThermoFisherにも問い合わせたのですが向こう様も両方入れることを推奨する、とのことでした。
ちなみにのちなみにでCD3だけとCD3とCD28両方入っている群もつけてみようかな、と今思い始めております。(実験上、ここは深く検討する必要もないところですが。)

非常に参考になりました。み様、おお様、ema様、お時間をさいていただき、また情報リンクを貼っていただきありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.9816-4 - 2021/07/22 (木) 16:55:41 - ema
高濃度であればCD3だけでも刺激は入りますが、弱いです。問題ないならCD3+CD28(固相化:私はPBS希釈ではなくアルカリ側の液でつけてから洗浄をPBSでやっていました。例 https://www.abcam.co.jp/blog/index.cfm/2014/6/12/ELISA_Protocol
最近はこんなものも売っているみたいです。
https://www.veritastk.co.jp/sciencelibrary/learning/dynabeads-t-activator.html

(無題) 削除/引用
No.9816-3 - 2021/07/22 (木) 10:34:32 - おお
https://www.liebertpub.com/doi/pdf/10.1089/154732804323099244

(無題) 削除/引用
No.9816-2 - 2021/07/22 (木) 09:29:03 - み
確かCD3でも刺激入ったと思います。
CD3抗体はおらかじめ培養皿にコートしてますか?
液に加えただけで刺激が入るかは知りません。

T細胞培養の抗体、CD3だけでは不十分? 削除/引用
No.9816-1 - 2021/07/22 (木) 04:52:29 - TT
現在ヒトPBMCからT細胞をセレクションしましてこのT細胞を活性化、及び培養したいと思っております。ダイナビーズは使わずに抗体を刺激として入れようと思っているのですが、CD3だけでは不十分でしょうか?CD3とCD28の両方必要でしょうか?IL-2は入れます。CD3とIL-2で培養しているのですがどうも増えているような気がせず、ThermoFisherを見るとCD28も入れているようですが。。。ご経験のある方、コメントをしていただければ幸いです。よろしくおねがいします。

5件 ( 1 〜 5 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。