唾液等の細胞を含む体液からパラフィンセルブロックを作製したいと考えています。
以下の方法で、遠心して細胞を集めてセルブロックにしようとしているのですが、薄切の際にボロボロになってしまって上手くいきません。おそらくパラフィン浸透不足ではないかと思うのですが、どのようにしたらうまくセルブロックを作成できるのでしょうか。ご存知の方いらっしゃいましたら助言いただけると幸いです。
@唾液をチューブに採取し、ホルマリンを添加し固定→A遠心後上清を捨て、アルコールを加えて攪拌し数十分放置後、遠心→Aを数回繰り返す→B遠心後上清を捨て、キシレンを加えて攪拌し数十分放置後、遠心→Bを数回繰り返す→C遠心後上清を捨て、チューブに溶けたパラフィンを入れて恒温槽で数十分放置→Dチューブ内のパラフィンをデカントで捨て(細胞はペレット状になっている)、新しいパラフィンを入れ、恒温槽で数十分放置→Dを数回繰り返す→Eチューブから取り出しパラフィン包埋。 |
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