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定常発現細胞のコントロール細胞について
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No.9804-TOPIC - 2021/07/14 (水) 20:05:59 - 7Fpath
遺伝子A発現ベクター(選択マーカーはネオマイシン耐性遺伝子)を用いて遺伝子A定常発現細胞を構築した場合、コントロール細胞は空ベクターを安定導入した細胞が一般的だと思うのですが、遺伝子A発現ベクターを導入した細胞群において取れてくる、ネオマイシン耐性だが遺伝子Aを発現していない細胞はコントロール細胞として使用可能なのでしょうか?
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No.9804-4 - 2021/07/16 (金) 09:19:08 - 7Fpath
ご意見ありがとうございます。参考にさせて頂きます。
(無題)
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No.9804-3 - 2021/07/15 (木) 00:31:49 - おお
普通はやらないと思う。
>遺伝子A発現ベクターを導入した細胞群において取れてくる、ネオマイシン耐性だが遺伝子Aを発現していない細胞は
発現してないというが、検出感度以下で発現している可能性は考えなくていのか。
検出で引っかからないような欠失やTrancationが起きている可能性を否定できるのか。
など不安要素はあると思います。
高発現、低発現クローンを取るというのはやられることがありますけど。
(無題)
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No.9804-2 - 2021/07/14 (水) 22:11:40 - QWERTYU
遺伝子導入後になんかよくわからないことが起きてそうしたものが取れてきたと思うので、普通に空ベクター導入した細胞があるのだし、わざわざよくわからないものをあえて使うことはないと思う。でないと結果の解釈に困ることが出てくるかもしれないし、それで、本来ならしなくていい実験をすることになるしあまりいいことはないと思う。
定常発現細胞のコントロール細胞について
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No.9804-1 - 2021/07/14 (水) 20:05:59 - 7Fpath
遺伝子A発現ベクター(選択マーカーはネオマイシン耐性遺伝子)を用いて遺伝子A定常発現細胞を構築した場合、コントロール細胞は空ベクターを安定導入した細胞が一般的だと思うのですが、遺伝子A発現ベクターを導入した細胞群において取れてくる、ネオマイシン耐性だが遺伝子Aを発現していない細胞はコントロール細胞として使用可能なのでしょうか?
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