Bio Technical フォーラム

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プライマーの希釈 トピック削除
No.9794-TOPIC - 2021/07/10 (土) 15:09:42 -
プライマー注文後、希釈する場合は超純水でもよいでしょうか?
以前はnuclease free waterで希釈していたのですが、DNAであれば超純水でも問題ないと聞きました。
 
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(無題) 削除/引用
No.9794-3 - 2021/07/11 (日) 07:20:33 - おお
>超純水は常識的にnuclease-free

同じツッコミをしようかと考えていた。昔は蒸留水か、それから作ったTEなどのバッファーをDNAの実験に使っていた。オートクレーブした蒸留水やバッファーを使うラボもあったようだけど(多分Nucleaseがどのようにどこで混じっているかわからないからか、バクテリアなどの実験でつかうからだろう、あるいはイオン交換水をメインに使っていたから)、それも必要ないと思う。
ミリQなど純水精製装置からとったものであればまず大丈夫だと思う。DNaseはEDTAがあれば活性が阻害されるので、気になるならTEにしておけばいいと思う。

(無題) 削除/引用
No.9794-2 - 2021/07/10 (土) 21:38:13 - G25
超純水は常識的にnuclease-freeと見做して良いです。
nuclease-freeとうたっているものはnucleaseのアッセイ(一定の条件で核酸とインキュベートして分解の程度を調べる)をして、核酸の分解が認められないことを保証をつけているという違いだけ。
まあ、こだわるところじゃないです。

それより、溶媒は純水よりもバッファにした方が安定性が高いです。
核酸自体が酸性のため、純水だと酸でプライマーが分解されやすい。
少なくとも長期保存するつもりの濃縮ストックは10 mM TrisやTEにした方が賢い。

プライマーの希釈 削除/引用
No.9794-1 - 2021/07/10 (土) 15:09:42 -
プライマー注文後、希釈する場合は超純水でもよいでしょうか?
以前はnuclease free waterで希釈していたのですが、DNAであれば超純水でも問題ないと聞きました。

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