Bio Technical フォーラム

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組織の自家蛍光が半端なく強い件 トピック削除
No.9789-TOPIC - 2021/07/07 (水) 21:53:54 - hjkl;
蛍光免疫法で心臓の組織を染色しているのですが、自家蛍光が緑も赤も半端なく強く困っています。でも論文とかの写真を見ると自家蛍光はほとんど見えずBGは綺麗に黒いです。どうすれば自家蛍光減らせますか。
 
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No.9789-6 - 2021/07/08 (木) 13:45:47 - AA
封入剤のせいという可能性もあります。

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No.9789-5 - 2021/07/08 (木) 12:55:33 - G25
どのフィルターでも同じように光るなら、自家蛍光ではなくて光散乱の可能性もあるのでは、

(無題) 削除/引用
No.9789-4 - 2021/07/08 (木) 12:49:34 - hjkl;
凍結切片です。切片にした後で短時間PFA固定してます。
組織内の特定の構造物が強く染まるというのではなくて、心筋全体とかがバーッという感じで緑色に見えるという感じです。論文とか見るとBGが全然ないFigとかもあって、どういう風に調節してるのだろうと思って聞きました。

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No.9789-3 - 2021/07/08 (木) 12:45:57 - iaau
血液がちゃんと抜けてるかとか。

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No.9789-2 - 2021/07/08 (木) 10:31:04 - 独り言
凍結切片ですか?

例えば、週齢が高いほど、リポフスチンなどが増加して自家蛍光がどの組織でも増えていくことがありますが、週齢が高いのであれば、その可能性があるかなと思います。

組織の自家蛍光が半端なく強い件 削除/引用
No.9789-1 - 2021/07/07 (水) 21:53:54 - hjkl;
蛍光免疫法で心臓の組織を染色しているのですが、自家蛍光が緑も赤も半端なく強く困っています。でも論文とかの写真を見ると自家蛍光はほとんど見えずBGは綺麗に黒いです。どうすれば自家蛍光減らせますか。

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