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マクロファージや樹状細胞を他の細胞と見分ける方法 トピック削除
No.977-TOPIC - 2012/10/01 (月) 10:06:22 - komattarooo
顕微鏡の明視野でマクロファージや樹状細胞を他の細胞と見分けたいのですが何か良い方法はないでしょうか?
形態学的なものではなく、明視野で見える色や貪食的な方法が良いのですが…
ビーズを食べさせる方法を考えましたが小さくて見えな倍率です。ビーズに色が付いていたらいけそうな気はしていますが…
あと、市販のインクを食べさせてみましたがダメでした。
何か良いアイデアをお持ちの方がいればご教授お願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.977-11 - 2012/10/16 (火) 10:07:58 - あ
ビーズに樹状細胞マーカー抗体をつければ良いのでは?

(無題) 削除/引用
No.977-10 - 2012/10/02 (火) 22:57:16 - komattarooo
>うさん

返信ありがとうございます。
私もそう思います。
ですので、実験を複数に分け、マクロファージの表面抗原などと合わせて貪食するかどうかを検討した後、分けれそうなら使うという考えです。

(無題) 削除/引用
No.977-9 - 2012/10/02 (火) 22:53:06 - komattarooo
>7744さん

返信ありがとうございます。
また論文も検索してみたいと思います。

(無題) 削除/引用
No.977-8 - 2012/10/02 (火) 16:35:27 - う
どの程度まで、マクロファージだ
と言いたいのかわかりませんが、

貪食能があるので、それがマクロファージであるいうのは、
受け入れられるか、私は疑わしいと思います。
より貪食能が高い、と少なくとも比較するものが無ければ。

逆に、貪食能が低いからといってマクロファージでは無いとも
言い切れるとは思いません。

通常は、表面抗原だったり、貪食能だったり
複数のパラメータを見て初めて、ものを言うことだと思います。

(無題) 削除/引用
No.977-7 - 2012/10/02 (火) 15:20:59 - 7744
クッパー細胞に墨汁を食わせるという実験はみたことある気がするので、ちょっと検索すれば見つかるかも。論文とかもあって条件とかわかるかもよ。
インクみたいなのじゃなくて、微小な顆粒のようなものの方がいいのかも。
そっちの分野じゃないのでわからないですが。

(無題) 削除/引用
No.977-6 - 2012/10/01 (月) 19:37:30 - komattarooo
返信ありがとうございます。
とりあえず墨汁で試してみようと思います。
ありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.977-5 - 2012/10/01 (月) 17:56:30 - KEN
手っ取り早いのは、仰られるような蛍光ビーズを使うのが良い気と思いますが、すでに3色の抗体ということですので、仰られるように通常の蛍光顕微鏡では厳しいですね。
共晶点レーザーは、可能な機種もあります。
私なら、抗体を2個ずつ程度にわけて蛍光ビーズを用います。(手間はかかるかもしれませんが。。。)
インクって、墨汁と組成違いますよね?
純粋に炭素を食わせるには、墨汁使ったほうが、良いのでは?
条件変えたら、なんとかいけそうな気もしますが。。。
あとは、蛍光しないとなると、思い浮かぶのは、カルミン色素とかですが、私は分からないので自信はないですが、下手な色素を食わせると自家蛍光なんか持ったりしてやっかいなことになりそうな予感がします。

ちょっと調べたほうが良いかもしれません。

(無題) 削除/引用
No.977-4 - 2012/10/01 (月) 12:15:55 - komattarooo
パスワードを入力する前にentaer押してしまったので変更することもできずになってしまいました。すいません。

具体的な内容は言えないのですが、腫瘍組織を酵素で溶かし、分離した細胞をシャーレに張り付けて観察しています。
腫瘍組織内にいる、ある細胞を特定したいのですが、マクロファージや樹状細胞と形体がよく似ていますので、明視野では判別しにくいです。
ある細胞が何かは言えないのですが、貪食能も少しはあるような細胞です。
ある細胞を特定するために蛍光標識した抗体を3つ使用していますので、蛍光は使用できません。
なので、何か明視野で判別できるようなものがあればと思っています。

(無題) 削除/引用
No.977-3 - 2012/10/01 (月) 10:33:02 - KEN
言わんとする事はわかります。
どのような目的の実験でしょうか?
観察する検体の状態を教えて下さい。

(無題) 削除/引用
No.977-2 - 2012/10/01 (月) 10:17:00 - ぱぱ
すっごく誤字が多い気がします。
投稿する前にはきちんとご自分の書かれた内容を読み返すべきです。
それすらできないようであれば実験も進まないのも当然に思えます。

マクロファージや樹状細胞を他の細胞と見分ける方法 削除/引用
No.977-1 - 2012/10/01 (月) 10:06:22 - komattarooo
顕微鏡の明視野でマクロファージや樹状細胞を他の細胞と見分けたいのですが何か良い方法はないでしょうか?
形態学的なものではなく、明視野で見える色や貪食的な方法が良いのですが…
ビーズを食べさせる方法を考えましたが小さくて見えな倍率です。ビーズに色が付いていたらいけそうな気はしていますが…
あと、市販のインクを食べさせてみましたがダメでした。
何か良いアイデアをお持ちの方がいればご教授お願いします。

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