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MDSC フローサイトメトリーについて トピック削除
No.9747-TOPIC - 2021/06/14 (月) 12:59:32 - 実験はじめました
マウスの脾臓、肝臓からフローサイトメトリーを用いてMDSCを見たいのですが、ss fsのドットプロットからどのあたりをゲーティングしたら良いのでしょうか？
リンパと、顆粒球のあたりなのでしょうか？詳しい方教えて下さい。因みに抗体はGr-1とCD11bを使います。
　
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No.9747-3 - 2021/06/27 (日) 09:14:50 - PF
マウス脾臓なら、FSCは単球まで含めて、SSCは顆粒球まで含めてゲートすれば良いと思います。MDSCは一応未分化の骨髄球系細胞を含むとされているので、リンパ球の集団はゲートアウトしない方が良いです。リンパ球がゲートに入ると解析でノイズが出るようなら、B/Tのlineage markerで非リンパ球を選択すれば解析しやすくなると思います。

肝臓の場合は、hepatocyteが混在するので、CD45で造血系細胞をゲートして解析する方が簡単かもしれませんね。

(無題) 削除/引用
No.9747-2 - 2021/06/24 (木) 00:35:17 - ど素人
こんにちは。

自分では MDSC を解析したことはありませんが、以下の論文の figure にて gating strategy が示されております。これを見る限り、FSC/SSC で特定の小さい領域をゲーティングするとは書かれていません。ですから、FSC/SSC で明らかに細胞でないと分かるイベント以外は除外せず、マーカーでゲーティングしているようです。

https://www.nature.com/articles/ncomms12150/figures/1

PMN-MDSC (CD11b+Ly6G+Ly6Clo)
M-MDSC (CD11b+Ly6G−Ly6Chi)

MDSC フローサイトメトリーについて 削除/引用
No.9747-1 - 2021/06/14 (月) 12:59:32 - 実験はじめました
マウスの脾臓、肝臓からフローサイトメトリーを用いてMDSCを見たいのですが、ss fsのドットプロットからどのあたりをゲーティングしたら良いのでしょうか？
リンパと、顆粒球のあたりなのでしょうか？詳しい方教えて下さい。因みに抗体はGr-1とCD11bを使います。
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