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(無題) 削除/引用 No.9733-3 - 2021/06/08 (火) 00:09:08 - まる AAさんありがとうございます。やはり買った方が良さそうですね。

(無題) 削除/引用 No.9733-2 - 2021/06/07 (月) 09:50:13 - AA リコンビナントタンパク質の精製は不慣れな人が始めるとそれだけで詰まる要因になります。 必要な量にもよるんでしょうが、今はCas9はかなり安価に手に入る(例：NEBで400pmolが18600円)ので、新たに大量精製の系を立ち上げるほどではないと思います。 sgRNAは配列の種類分だけ用意しないといけないことを考えるとIVTの系があるならそちらのほうが安くなる可能性は高いですが、こちらについても系がないなら買ったほうが確実かもしれません。 (よく使用されるAmbionのeMessage kitは25反応で10万円です)

Cas9、sgRNAの精製 削除/引用 No.9733-1 - 2021/06/07 (月) 00:49:18 - まる Cas9タンパクとsgRNAをプラスミドベースで増やして回収後、チューブで反応させてRNPの状態で細胞に導入を考えています。 この場合Cas9タンパクとsgRNAそれぞれ何かしら標識を付けて精製する必要があるかと思われますが、コスト面ではやはり高くつきますでしょうか？ それよりもsgRNAは外注で合成してもらい、Cas9タンパクを購入した方が安いでしょうか？ ちなみにCas9かsgRNAかどちらかに蛍光などの標識を付ける予定です。 数も少なめです。 よろしくお願い致します。

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